[發明專利]一種山羊Mvostaion基因敲除載體的構建系統

在審

• 申請號: 201810407686.4
• 申請日: 2018-05-02
• 公開（公告）號: CN108611427A
• 公開（公告）日: 2018-10-02
• 發明（設計）人: 劉勇;李文雍;吳曉慶;謝娟;葉世超;凌英會;章孝榮
• 申請（專利權）人: 阜陽師范學院
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12M1/33
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 談杰

本發明屬于基因工程技術領域，公開了一種山羊Mvostaion基因敲除載體的構建系統，設置有底臺，所述底臺上表面安裝有：細胞裂解室、載體分離室、過柱純化室、載體洗脫室；所述底臺的前端通過螺母固定有控制面板，所述底臺的一側通過螺母與定軸固定有提手。本發明能夠在較短的時間內得到基因敲除載體，為工作人員分析山羊Mvostation基因敲除載體提供了較大的幫助；同時，本發明能夠簡單、快速、成本低、精確的檢測其單核苷酸的多態性；通過基因優化模塊可以提升基因轉錄表達水平，提供優良的基因。

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，尤其涉及一種山羊Mvostaion基因敲除載體的構建系統。

背景技術

基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的，是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物技術，基因敲除是基因打靶技術的一種，類似于基因的同源重組，指外源DNA與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發生同源重組，基因敲除克服了隨時整合的盲目性和偶然性，是一種理想的修飾、改造遺傳物質的方法。傳統的基因敲除載體構建利用傳統的細胞裂解法獲取，經過載體的分離、純化、RNA的去除、沉淀等步驟，需要消耗三個小時左右，浪費了科研工作者的較多時間。

綜上所述，現有技術存在的問題是：構建載體的步驟較為繁瑣，浪費了較多的時間；同時，現有對山羊基因多態性檢測速度慢、成本高、準確性差；以及現有山羊基因轉錄表達水平低，導致優良基因少。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種山羊Mvostaion基因敲除載體的構建系統。

本發明是這樣實現的，一種山羊Mvostaion基因敲除載體的構建系統設置有：

控制面板、底臺；

所述底臺安裝于整個系統的最下方，所述細胞裂解室、載體分離室、過柱純化室、載體洗脫室卡接在底臺的上表面，所述四個功能室的前端開有菌體入口，所述細胞裂解室分為上下兩部分，上部分安裝有37℃水浴盒；下方安裝有-20℃液氨盒，所述載體分離室內部卡接有臺式高速離心機，所述過柱純化室內部安裝有純化柱，所述載體洗脫室內部安裝有載體提取洗脫液盒；

所述控制面板上設置有基因檢測模塊、基因優化模塊；

基因檢測模塊，用于檢測山羊基因單核苷酸的多態性；

基因優化模塊，用于優化山羊的基因轉錄表達。

進一步，所述提手通過螺母與定軸固定在底臺的一側。

進一步，所述四個功能室前端的入口處通過螺母固定有拉手。

進一步，所述基因檢測模塊檢測方法如下：

a)鑒定各個山羊多聚腺苷酸化基序序列及其在所述編碼序列內的位置；

b)通過密碼子取代優化所述編碼序列，從而獲得編碼所述非植物蛋白的優化的編碼序列；

c)將公開于表1中的至少一個多聚腺苷酸化基序序列引入所述優化的基因序列，從而獲得修飾的編碼序列，所述修飾的編碼序列包含至少一個山羊多聚腺苷酸化基序，以及所述修飾的編碼序列編碼所述非植物蛋白。

進一步，所述步驟c)中引入所述優化的序列內的各個多聚腺苷酸化基序是步驟a)中鑒定的山羊多聚腺苷酸化基序，并且被引入和其在編碼序列內的位置相對應的核酸位置。

進一步，所述步驟a)中鑒定的山羊多聚腺苷酸化基序在步驟c)中被引入與其在編碼序列內的位置相同的核酸位置，從而獲得修飾的編碼序列，所述修飾的編碼序列包含與山羊編碼序列相同的多聚腺苷酸化基序的組合。