[發明專利]抗破傷風毒素中和抗體、其制備方法及用途

有效

• 申請號: 201810404462.8
• 申請日: 2018-04-28
• 公開（公告）號: CN108610417B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 廖化新;鄭偉宏;王月明;袁曉輝
• 申請（專利權）人: 暨南大學;珠海泰諾麥博生物技術有限公司;廣州泰諾迪生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/577;G01N33/569;A61K39/395;A61P31/04
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種抗原結合片段，其特征在于，所述抗原結合片段的輕鏈可變區的互補決定區CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，輕鏈可變區的互補決定區CDR2的氨基酸序列如SEQID NO.2所示，輕鏈可變區的互 補決定區CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述抗原結合片段的重鏈可變區的互補決定區CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，重鏈可變區的互補決定區CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，重鏈可變區的互補決定區CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。

2.根據權利要求1所述的抗原結合片段，其特征在于，所述抗原結合片段的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述抗原結合片段的重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

3.一種全人源抗破傷風毒素中和抗體，其特征在于，所述中和抗體包括如權利要求1或2所述的抗原結合片段；

所述抗體的恒定區包括人源IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定區中的任意一種或至少兩種的組合。

4.根據權利要求3所述的中和抗體，其特征在于，所述抗體的恒定區為人源IgG1恒定區。

5.一種DNA片段，其特征在于，所述DNA片段包括編碼如權利要求1或2所述的抗原結合片段或如權利要求3所述抗體的核苷酸序列。

6.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體包括如權利要求5所述的DNA片段。

7.根據權利要求6所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體為pcDNA3.3載體。

8.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有如權利要求5所述的DNA片段和/或如權利要求6或7所述的表達載體。

9.根據權利要求8所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為CHO細胞或293細胞。

10.一種制備如權利要求1或2所述抗原結合片段和/或如權利要求3所述抗體的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)采集免疫個體的B細胞，PCR獲得抗體可變區的DNA片段；

(2)將步驟(1)所述DNA片段連接入表達載體，轉入感受態細胞，培養后挑取單克隆細胞進行篩選；

(3)將篩選后的表達載體轉入宿主細胞，培養并收集上清液，分離純化得到所述抗原結合片段和/或抗體。

11.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括如權利要求1或2所述抗原結合片段、如權利要求3或4所述抗體、如權利要求5所述的DNA片段、如權利要求6或7所述的表達載體或如權利要求8或9所述的宿主細胞中的任意一種或至少兩種的組合。

12.根據權利要求11所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物還包括藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑中的任意一種或至少兩種的組合。

13.一種試劑盒，其特征在于，所述 試劑盒包括如權利要求1或2所述抗原結合片段、如權利要求3或4所述抗體、如權利要求5所述的DNA片段、如權利要求6或7所述的表達載體或如權利要求8或9所述的宿主細胞中的任意一種或至少兩種的組合。

14.根據權利要求13所述的試劑盒，其特征在于，所述 試劑盒還包括洗滌液。

15.一種如權利要求1或2所述抗原結合片段、如權利要求3或4所述抗體、如權利要求5所述的DNA片段、如權利要求6或7所述的表達載體或如權利要求8或9所述的宿主細胞在制備破傷風藥物和/或檢測試劑中的應用。