[發(fā)明專利]一種快速檢測細交鏈格孢酮酸的免疫層析試紙條有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810402378.2 | 申請日: | 2018-04-28 |
| 公開(公告)號: | CN108776219B | 公開(公告)日: | 2021-09-03 |
| 發(fā)明(設計)人: | 王蒙;韋迪哲;馮曉元;姜冬梅;付海龍 | 申請(專利權)人: | 北京農(nóng)業(yè)質量標準與檢測技術研究中心 |
| 主分類號: | C07D207/38 | 分類號: | C07D207/38;C07K14/77;C07K14/765;C07K16/14;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/532 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 快速 檢測 細交鏈格孢酮酸 免疫 層析 試紙 | ||
1.細交鏈格孢酮酸半抗原,其特征在于,其結構如式(I)所示:
2.細交鏈格孢酮酸全抗原,其特征在于,由權利要求1所述細交鏈格孢酮酸半抗原與載體蛋白偶聯(lián)后得到的;
其中,所述載體蛋白選自牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白、人血清白蛋白。
3.根據(jù)權利要求2所述的細交鏈格孢酮酸全抗原,所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清蛋白。
4.由權利要求2或3所述細交鏈格孢酮酸全抗原制備的特異性抗體,包括多克隆抗體和單克隆抗體。
5.權利要求1所述細交鏈格孢酮酸半抗原的制備方法,其特征在于,將細交鏈格孢酮酸200mg和羧甲基羥胺半鹽酸鹽130mg溶解于10mL無水甲醇中,加入2mL 98%冰醋酸,室溫攪拌3h;減壓蒸去有機溶劑,剩余水相通過制備液相色譜儀純化,然后凍干即得。
6.細交鏈格孢酮酸檢測試劑,其特征在于,由權利要求1所述細交鏈格孢酮酸半抗原,或權利要求2或3所述細交鏈格孢酮酸全抗原,或權利要求4所述特異性抗體制備得到。
7.細交鏈格孢酮酸檢測試劑盒,其特征在于,由權利要求1所述細交鏈格孢酮酸半抗原,或權利要求2或3所述細交鏈格孢酮酸全抗原,或權利要求4所述特異性抗體制備得到。
8.權利要求1所述細交鏈格孢酮酸半抗原在細交鏈格孢酮酸的免疫分析檢測中的應用。
9.權利要求2或3所述細交鏈格孢酮酸全抗原在細交鏈格孢酮酸的免疫分析檢測中的應用。
10.權利要求4所述特異性抗體在細交鏈格孢酮酸的免疫分析檢測中的應用。
11.權利要求6所述檢測試劑在細交鏈格孢酮酸的免疫分析檢測中的應用。
12.權利要求7所述檢測試劑盒在細交鏈格孢酮酸的免疫分析檢測中的應用。
13.權利要求1所述細交鏈格孢酮酸半抗原在制備細交鏈格孢酮酸的膠體金檢測試紙條中的應用。
14.權利要求2或3所述細交鏈格孢酮酸全抗原在制備細交鏈格孢酮酸的膠體金檢測試紙條中的應用。
15.權利要求4所述特異性抗體在制備細交鏈格孢酮酸的膠體金檢測試紙條中的應用。
16.權利要求6所述檢測試劑在制備細交鏈格孢酮酸的膠體金檢測試紙條中的應用。
17.一種快速檢測細交鏈格孢酮酸的免疫層析試紙條,其特征在于,包括樣品墊、膠體金結合墊、反應膜、吸水墊和底板,所述反應膜上設有檢測線和質控線,所述樣品墊、膠體金結合墊、反應膜和吸水墊依次粘貼在底板上;
其中,所述膠體金結合墊上包被有細交鏈格孢酮酸特異性抗體-膠體金標記物;所述檢測線包被有權利要求2或3所述細交鏈格孢酮酸全抗原,所述質控線包被有羊抗鼠二抗。
18.根據(jù)權利要求17所述的試紙條,其特征在于,所述細交鏈格孢酮酸特異性抗體-膠體金標記物的制備方法如下:用還原劑將氯金酸還原成膠體金納米顆粒;將膠體金與細交鏈格孢酮酸特異性抗體混合孵育30min,加入牛血清白蛋白使其終濃度為1%,反應30min后;離心純化、濃縮即得細交鏈格孢酮酸特異性抗體-膠體金標記物。
19.利用權利要求17或18所述試紙條檢測細交鏈格孢酮酸的方法,其特征在于,將待測樣品粉碎,向2~10g樣品中加入體積濃度為80%的甲醇水溶液8~50mL,混勻,振蕩提取30min,靜置5~10min,將上清液用水稀釋,使稀釋液中甲醇的終體積濃度為20%~30%,得到待測樣品溶液;將待測樣品溶液滴加到所述試紙條的樣品墊上進行檢測,根據(jù)檢測線和質控線的顯色結果判定。
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