[發(fā)明專利]一種從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物及其制備和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810400853.2
• 申請(qǐng)日: 2018-04-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110407847B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂雪峰;張偉;黃雪年
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過(guò)程研究所
• 主分類號(hào): C07D493/04
• 分類號(hào): C07D493/04;C07D311/76;C12P17/06;C12P17/18;A61P35/00;C12R1/66
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

1.一種從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物，其特征在于：化合物結(jié)構(gòu)式為式一、式二或式三所示，

式一中，R₁為H或C₁-C₅的烷基；R₂為X₁、X₂、X₃或X₄；R₃為CH₂OH、CH₂OCH₃、CHO或CH(OCH₃)₂；其中，X₁為X₂為X₃為X₄為

2.按權(quán)利要求1所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物，其特征在于：所述式一中R₁為H、甲基或乙基。

3.一種權(quán)利要求1所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的制備方法，其特征在于：

1)將每升去離子水中含1×10⁸～2×10⁸個(gè)A.terreus CICC40205菌株的孢子的水溶液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)至發(fā)酵液變紅；

2)將上述發(fā)酵液經(jīng)乙酸乙酯萃取，發(fā)酵后菌體經(jīng)甲醇與二氯甲烷混合物萃取，而后將發(fā)酵液與菌體萃取后有機(jī)相合并，減壓濃縮蒸干獲得發(fā)酵粗提物；

3)將上述獲得發(fā)酵粗提物依次通過(guò)減壓正相硅膠柱層析、減壓反相硅膠柱層析以及半制備高壓液相色譜，即可依次獲得式一、式二或式三所示化合物。

4.按權(quán)利要求3所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的制備方法，其特征在于：所述步驟1)將菌株A.terreus CICC40205接種到土豆瓊脂平板(PDA)上，28-30℃培養(yǎng)7-10天，待孢子長(zhǎng)滿平板，用無(wú)菌水洗下孢子按照1×10⁸～2×10⁸個(gè)/L的濃度接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中28-30℃，220-250rpm搖床培養(yǎng)7-10天。

5.按權(quán)利要求4所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的制備方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基為每升水中，葡萄糖20-70g，蔗糖10-40g,蛋白胨1-5g，酵母抽提物1-5g，醋酸鈉1-5g，磷酸二氫鉀0.04-0.4g，七水硫酸鎂0.1-1g，檸檬酸鈉2-10g和碳酸鈣1.5-5g，PH調(diào)至6.0-7.0。

6.按權(quán)利要求3所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的制備方法，其特征在于：所述步驟2)發(fā)酵后將菌體與發(fā)酵液分離，發(fā)酵液采用乙酸乙酯萃取3-4遍，菌體采用甲醇與二氯甲烷混合液萃取3-4遍，合并有機(jī)相，減壓濃縮蒸干獲得發(fā)酵粗提物；其中，甲醇與二氯甲烷混合液為按體積比為1:1混合。

7.按權(quán)利要求3所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的制備方法，其特征在于：所述步驟3)將粗提物首先進(jìn)行減壓正相硅膠柱層析，固定相為200-300目的正相硅膠，流動(dòng)相先采用10％的乙酸乙酯-石油醚混合溶劑洗脫，然后采用100％乙酸乙酯洗脫，收集100％乙酸乙酯的洗脫液減壓濃縮蒸干，再進(jìn)行減壓反相硅膠柱層析，固定相為粒徑40μm的反相硅膠，流動(dòng)相用20-100：80-0的甲醇-水進(jìn)行洗脫，收集各洗脫組份采用半制備液相進(jìn)行分離純化，即得式一、式二或式三所示化合物。

8.一種權(quán)利要求1所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的應(yīng)用，其特征在于：所述式一、式二或式三所示化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

9.按權(quán)利要求8所述的從土曲霉中獲得的azaphilones類化合物的應(yīng)用，其特征在于：所述式一、式二或式三所示化合物在制備抗肺癌細(xì)胞A549、肝癌細(xì)胞HepG2或結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116藥物中的應(yīng)用。