[發明專利]十倍體長穂偃麥草藍粒性狀專化分子標記和熒光原位雜交探針的開發及應用

有效

• 申請號: 201810399771.0
• 申請日: 2018-04-28
• 公開（公告）號: CN108396026B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 鄭琪;劉利勤;張靜;羅巧玲;李宏偉;李濱;李振聲
• 申請（專利權）人: 中國科學院遺傳與發育生物學研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/6841
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;陳曉慶

1.長穗偃麥草4Ag染色體分子標記，是以長穗偃麥草的基因組DNA為模板，采用引物對M進行擴增得到的DNA分子：

所述引物對M由序列1所示的單鏈DNA分子和序列2所示的單鏈DNA分子組成。

2.用于檢測或輔助檢測長穗偃麥草4Ag染色體的探針，為序列3所示的DNA分子。

3.根據權利要求2所述的探針，其特征在于：所述探針標記有熒光基團。

4.用于檢測或輔助檢測長穗偃麥草4Ag染色體的引物對，為權利要求1中所述的引物對M。

5.用于檢測或輔助檢測長穗偃麥草4Ag染色體的PCR試劑，包括權利要求4所述的引物對。

6.用于檢測或輔助檢測長穗偃麥草4Ag染色體的試劑盒，包括權利要求4所述的引物對或權利要求5所述的PCR試劑。

7.權利要求1所述的分子標記或權利要求2或3所述的探針或權利要求4所述的引物對或權利要求5所述的PCR試劑或權利要求6所述的試劑盒在如下1)-12)中任一種中的應用：

1)檢測或輔助檢測長穗偃麥草4Ag染色體；

2)制備檢測或輔助檢測長穗偃麥草4Ag染色體的產品；

3)檢測或輔助檢測待測小麥中是否含有長穗偃麥草4Ag染色體；

4)制備檢測或輔助檢測待測小麥中是否含有長穗偃麥草4Ag染色體的產品；

5)檢測或輔助檢測待測小麥是否為藍粒小麥；

6)制備檢測或輔助檢測待測小麥是否為藍粒小麥的產品；

7)檢測或輔助檢測待測小麥是否含有長穂偃麥草基因組；

8)制備檢測或輔助檢測待測小麥是否含有長穂偃麥草基因組的產品；

9)分子標記輔助選擇育種；

10)制備分子標記輔助選擇育種的產品；

11)小麥分子育種；

12)制備小麥分子育種的產品。

8.一種檢測或輔助檢測待測小麥中是否含有長穗偃麥草4Ag染色體的方法，為如下(a1)或(a2)：

(a1)包括如下步驟：用權利要求2或3所述的探針對待測小麥進行原位雜交，若出現點狀的雜交信號，則表示待測小麥中含有或候選含有長穗偃麥草4Ag染色體；若未出現點狀的雜交信號，則表示待測小麥中不含有或候選不含有長穗偃麥草4Ag染色體；所述原位雜交不含有封阻的步驟；

(a2)包括如下步驟：用權利要求4所述的引物對對待測小麥進行PCR擴增，若擴增得到大小為329bp的條帶，則表示待測小麥中含有或候選含有長穗偃麥草4Ag染色體；若未擴增得到大小為329bp的條帶，則表示待測小麥中不含有或候選不含有長穗偃麥草4Ag染色體。

9.一種檢測或輔助檢測待測小麥是否為藍粒小麥的方法，為如下(b1)或(b2)：

(b1)用權利要求2或3所述的探針對待測小麥進行原位雜交，若出現點狀的雜交信號，則表示待測小麥為或候選為藍粒小麥；若未出現點狀的雜交信號，則表示待測小麥不為或候選不為藍粒小麥；所述原位雜交不含有封阻的步驟；

(b2)用權利要求4所述的引物對對待測小麥進行PCR擴增，若擴增得到大小為329bp的條帶，則表示待測小麥為或候選為藍粒小麥；若未擴增得到大小為329bp的條帶，則表示待測小麥不為或候選不為藍粒小麥。

10.一種檢測或輔助檢測待測小麥中是否含有長穗偃麥草基因組的方法，為如下(c1)或(c2)：

(c1)包括如下步驟：用權利要求2或3所述的探針對待測小麥進行原位雜交，若出現點狀的雜交信號，則表示待測小麥中含有或候選含有長穗偃麥草基因組；若未出現點狀的雜交信號，則表示待測小麥中不含有或候選不含有長穗偃麥草基因組；所述原位雜交不含有封阻的步驟；

(c2)包括如下步驟：用權利要求4所述的引物對對待測小麥進行PCR擴增，若擴增得到大小為329bp的條帶，則表示待測小麥中含有或候選含有長穗偃麥草基因組；若未擴增得到大小為329bp的條帶，則表示待測小麥中不含有或候選不含有長穗偃麥草基因組。