[發明專利]一種微生物發酵類胡蘿卜素制備二氫獼猴桃內酯的方法

有效

• 申請號: 201810399552.2
• 申請日: 2018-04-28
• 公開（公告）號: CN108467875B
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 鄭堅強;司俊玲;周曉微;吳曉宗;田數;張俊杰;賈學偉;李天笑;許春平
• 申請（專利權）人: 鄭州輕工業學院
• 主分類號: C12P17/04
• 分類號: C12P17/04
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 鄭園;張真真

本發明公開了一種微生物發酵類胡蘿卜素制備二氫獼猴桃內酯的方法。本菌株來源于寧夏枸杞。該方法經過菌種活化，制備種子液，然后對富含類胡蘿卜素的植物材料進行發酵，或者采用粗酶催化富含類胡蘿卜素的植物原料材料，經過濾，萃取得到純度高、閾值低的二氫獼猴桃內酯香精。本技術發明技術操作簡單，技術參數穩定，設備投入少，工業化可行。該方法的發明，開創了生物技術制備食用香精香料的新型方法，有利于對富含類胡蘿卜素的農副產品，比如枸杞、番茄皮，胡蘿卜等，提高附加值，對這類產品的深加工具有很好的指導意義。

技術領域

本發明涉及食品生物技術領域，特別是指一種微生物發酵類胡蘿卜素制備二氫獼猴桃內酯的方法。

背景技術

類胡蘿卜素在自然間廣泛地分布，尤其是枸杞、番茄以及胡蘿卜等黃色植物原料，它是很多化合物的前體物質，可以降解C13-類胡蘿卜素（非萜類化合物），降解產物包括二氫獼猴桃內酯，二氫大馬酮等，這些是構成茶葉，玫瑰，煙草和葡萄酒等必需的香味物質。由于它們往往是低味閾值，而且其中很多是強有效的香氣化合物，因而引起了香料和香水行業的極大關注。直接從植物資源中獲得類胡蘿卜素的降解風味物質工作量大，產品得率低，導致這類技術成本高。而利用生物技術制備的風味物質純度高、產品得率高，得到的香氣化合物目標明確，能夠工業化生產，產品產量大。本技術發明從天然枸杞中篩選可以降解的類胡蘿卜素生成香氣物質的菌株，發酵降解類胡蘿卜素得到的二氫獼猴桃內酯香氣化合物，優化菌株發酵類胡蘿卜素生成香氣化合物的關鍵技術參數，為生物技術從富含類胡蘿卜素的天然植物中制備香氣物質提供科學依據，促進發酵技術在食用香精香料行業的應用。

目前，國內外制備食用香精香料主要是化工合成方法，化工合成主要不足是對環境危害大，產品中含有重金屬等，長時間使用，對人體有害，人工合成的產品中還有化工副產品，使用受到限制。目前在市場上，將近有80%的香精香料質是化學合成的。然而，德國在21世紀初，在食品中應用的7%的香精香料添加劑是天然的。這種趨勢的發展，有利于消費者健康和營養的模式消費結構的改善。利用生物技術生產香精香料近年來得到了快速的發展，根據市場穩定的發展趨勢，需要生產新的香精香料或者香料資源。化學合成方法和在植物中提取方法，仍舊有生命力，但是生物轉化產生香精香料越來越受到人們的重視。利用微生物技術產生香精香料在歐盟和美國的立法機構認為是安全的，天然的。利用生物工程技術，可以產生無窮無盡的質量均勻的產品。微生物技術轉化的香精香料具有天然型，有利于產品利潤的提高。天然產品和化學合成的芳香物質產品價格差別大，大幅增加產品附加值。通過生物技術制備高品質的香精香料，是香精香料行業未來的發展主要趨勢。

發明內容

本發明提出一種微生物發酵類胡蘿卜素制備二氫獼猴桃內酯的方法，解決了現有技術中二氫獼猴桃內酯制備條件嚴格，技術要求高的技術問題。

本發明的技術方案是這樣實現的：

一種微生物發酵類胡蘿卜素制備二氫獼猴桃內酯的方法，通過如下生產步驟制備獲得：

（1）菌種活化，從保藏培養基上挑取發酵菌株，接種到活化培養基中活化培養48h-72h；

所述發酵菌株具體為中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏編號：M2017593；名稱：Bacillus altitudinis SH161；保藏日期：2017年10月19日；地址：中國.武漢.武漢大學；郵編：430072；。

（2）制備種子液，將步驟（1）中活化后的菌種接種到種子培養基中，28-30℃、160r/min搖床培養36h-48h左右，制備種子液；

所述種子培養基配方：葡萄糖10 g/L，蛋白胨5 g/L，麥芽提取物3 g/L，酵母粉3.0g/L，K2HPO4 1.5 g/L，KCl 0.5 g/L，121 ℃，滅菌20 min。制備種子液時，具體裝液量具體例如為：100/300mL錐形瓶；