[發(fā)明專利]一種大鯢皮膠原蛋白提取方法和由該方法提取得到的膠原蛋白產(chǎn)品

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810396564.X
• 申請日: 2018-04-28
• 公開（公告）號: CN108314726B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟永祿;李燦;曹宇;白禹;王勇;唐金明;吳隆艷;羅暄巾;許抗抗
• 申請（專利權(quán)）人: 貴陽學(xué)院
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C07K1/30
• 代理公司: 北京格允知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11609
• 代理人: 譚輝;李亞東

1.一種從大鯢皮提取膠原蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）獲取大鯢皮；

（2）使用異丙醇浸泡大鯢皮以去除大鯢皮中的脂肪，獲得無脂肪大鯢皮；

（3）使用堿液浸泡無脂肪大鯢皮以去除大鯢皮中的色素，獲得無 色素大鯢皮；

（4）使用第一酸液浸提無色素大鯢皮，然后進(jìn)行固液分離，獲得包含膠原蛋白的粗提液；

（5）向所述粗提液中加入第一鹽液使膠原蛋白析出并進(jìn)行固液分離，獲得一次析出膠原蛋白；

（6）使用第二酸液將膠原蛋白完全溶解，再加入第二鹽液使膠原 蛋白析出并進(jìn)行固液分離，獲得二次析出膠原蛋白；

（7）將二次析出膠原蛋白進(jìn)行透析，然后進(jìn)行冷凍干燥，得到膠原蛋白粉末產(chǎn)品；

其中，在步驟（4）中，所述第一酸液為檸檬酸水溶液，濃度為 0.1至 0.3 M 并且浸提時(shí)間為 18 小時(shí)；固液分離通過如下方式進(jìn)行：用紗布粗過濾，然后將濾液于5000 r/min離心 20 分鐘，獲得粗提液；

在步驟（5）中，第一鹽液為 4.0-6.0 M 的 NaCl 水溶液，加入至粗 提液中后使得體系的 NaCl 濃度為 0.9 M，靜置 24 小時(shí)分層，然后于6000 r/min 離心 20 分鐘，獲得一次析出膠原蛋白；和

在步驟（6）中，第二酸液為 0.4-0.6 M 的醋酸水溶液，第二鹽液與第一鹽液相同，并且加入量使得體系的 NaCl 濃度為 0.9 M，獲得二次析出膠原蛋白；

所述膠原蛋白粉末產(chǎn)品包含 0.4 mg/g 以上的色氨酸和 5.0 mg/g 以上的丙氨酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求 1 所述的方法，其特征在于：

在步驟（1）中，大鯢皮為 0.4-0.5cm X 0.4-0.6cm 的小片；和/或所有步驟均在 2-4℃的環(huán)境中完成。

3.根據(jù)權(quán)利要求 1 所述的方法，其特征在于：在步驟（2）中，異丙醇為 8 重量%至 12重量%的異丙醇水溶液中，料液比為 1:10，浸 泡 24 小時(shí)，每 6 小時(shí)換液一次，浸泡結(jié)束后，用水漂洗至中性 pH，獲得無脂肪大鯢皮。

4.根據(jù)權(quán)利要求 1 所述的方法，其特征在于：在步驟（3）中，

所述堿液為 0.08-0.12 M 的氫氧化鈉水溶液，料液比為 1:20，浸泡時(shí)間 為 24 小時(shí)，每 6 小時(shí)換一次堿液，浸泡結(jié)束后，用水漂洗至中性 pH， 獲得無色素大鯢皮。

5.根據(jù)權(quán)利要求 1 至 4 中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：在步 驟（7）中，透析使用的透析袋的 MW=500，透析液為蒸餾水，透析時(shí)間為 2-4 天，透析液更換頻率為 8-12 小時(shí)/次。

6.由權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法制得的大鯢膠原蛋白產(chǎn)品。