[發明專利]一種分析系統

在審

• 申請號: 201810394669.1
• 申請日: 2018-04-27
• 公開（公告）號: CN110412139A
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發明（設計）人: 郭彥麗;濱田尚樹;端裕樹
• 申請（專利權）人: 株式會社島津制作所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/89
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

本發明涉及一種分析系統，該系統適用于高脂溶性成分的自動快速分析和檢測，本發明中，將待測樣品使用多維色譜系統進行含有高脂溶性成分樣品的在線預處理和分離；其中，所述多維色譜系統包括依次連接的超臨界色譜部分及反相液相色譜部分，所述反相液相色譜部分中包括一個或一個以上的反相液相色譜柱；所述超臨界色譜部分包括超臨界流動相、改性劑和超臨界用填料柱。

技術領域

本發明涉及一種分析系統，其適用于高脂溶性成分從油脂或生物樣品中中的分離，尤其適用于從油脂或生物樣品中分離維生素成分，屬于天然物質的分離領域。

背景技術

從一些油脂或生物樣品中分離高脂溶性成分，一直是研究的熱點，現有技術中對多種分離提取設備和方法進行了研究。

維生素成分，尤其是對維生素D成分的分離也進行了大量嘗試。維生素D₂(也被稱為麥角鈣化醇)和維生素D₃(膽鈣化醇)是脂溶性維生素，它們在鈣代謝中起著非常重要的作用。維生素D也影響其他代謝途徑。缺乏維生素D可導致嚴重的疾病，如佝僂病和骨骼減弱。通常，使用維生素D補充劑用于治療或預防維生素缺乏癥。維生素D也被添加到嬰兒配方奶粉，以滿足嬰兒的營養需求。但值得注意的是，過量攝入維生素D也可能是危險的。因此，在維生素補充劑和嬰兒配方食品中合適地使用維生素D在醫療和保健上都起著非常重要的作用。

由于維生素D含量較低，易受基質干擾，因此在檢測前，樣品溶液制備過程通常包括皂化、萃取等步驟。傳統上，維生素D測定的現有程序一般需要使用溶劑從油性或脂肪基質中萃取，然后通過正相液相色譜(NPLC)進行清潔，進而經過反相液相色譜柱(RPLC)進行分離和檢測。由于傳統的基于溶劑的提取技術首先是耗時，也需要密集的勞動，并且消耗了大量的有機溶劑，因此也進行了許多嘗試，以簡化的樣品制備過程。

為了分析嬰兒配方奶粉中的維生素D，開發了兩種反相液相色譜的二維柱切換系統用于在線清除提取物。引用文獻1公開了一種在線二維液相色譜法同時測定嬰幼兒和成人配方營養品中的維生素A、D₃和E的方法，其一維和二維分離均基于反相色譜。樣品經過皂化、萃取后，直接進樣分析，一次進樣即可在線完成樣品中各維生素的定量分析。但是，使用RPLC清洗從油狀物或脂質的基體中提取的樣品的過程會使得一些強疏水性的脂溶性雜質保留在RPLC柱中。雜質積累在色譜柱中，不僅會導致檢測物保留時間的改變，而且還會導致清潔柱的壽命縮短。

在另一方面，高效液相色譜法/超高效液相色譜-質譜(HPLC/UPLC-MS)使用更加簡單的樣品制備方法已被開發用于在油性維生素補充劑、嬰兒配方奶粉或生物流體中的維生素D分析。但是，通常情況下這樣的方法仍然需要離線溶劑萃取過程或正相固相萃取(SPE)處理以對樣品進行預處理或成分清理。引用文獻2涉及利用UPLC-MS/MS建立了一種快速、靈敏的、能夠同時測定嬰幼兒配方奶粉中脂溶性維生素A、D₂、D₃、α-生育酚的分析方法。但對于檢測樣品，仍然需要經過堿性無機物的處理以及有機溶劑的提取，在前處理的簡便性方面還有改進或提高的余地。

此外，為了獲得高效率的自動分析系統，仍然需要基于正相液體在線純化油性或脂肪樣品的色譜法。然后，可以使用反相液相色譜分析分離較少的脂肪洗脫液以提供更好的分辨率。然而，由于兩種不同類型的流動相的不匹配性，難以構建柱切換系統以同時包括正相和反相液相色譜。

此外，隨著超臨界流體技術的發展，也嘗試了使用超臨界萃取或超臨界色譜分析法對物質進行提取或分離。在超臨界技術中對于維生素D分離和分析中具有與NPLC相類似的保留時間和分離行為。引用文獻3公開了用柱色譜從與其它組分如脫氫膽固醇，速甾醇和光甾醇的混合物中分離維生素D₃或前維生素D₃的方法，所述色譜柱中的流動相為超臨界二氧化碳。但是該方法僅涉及合成維生素D產品后的分離或提純。