[發明專利]具有對疫霉的抗性的馬鈴薯轉基因植物

在審

• 申請號: 201810390969.2
• 申請日: 2013-08-06
• 公開（公告）號: CN108546713A
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發明（設計）人: D·J·施塔爾;N·特默
• 申請（專利權）人: KWS種子歐洲股份公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

1.農桿菌，包含已經穩定整合的雙鏈的第一DNA和雙鏈的第二DNA，以賦予針對疫霉屬卵菌的病原體抗性，其中所述第一和第二DNA的編碼鏈的核苷酸序列彼此完全或部分地反向互補，由此可以產生雙鏈RNA，其特征在于，所述第一DNA包含

(a)SEQ ID NO:38的核苷酸序列，或

(b)SEQ ID NO:38的核苷酸序列的至少15個連續核苷酸的片段，或

(c)與(a)或(b)的核苷酸序列之一互補的核苷酸序列，或

(d)在嚴格條件下，與(a)、(b)或(c)的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。

2.權利要求1的農桿菌，其中所述農桿菌是根癌農桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)。

3.權利要求1的農桿菌，其特征在于所述雙鏈RNA是miRNA或siRNA。

4.權利要求1的農桿菌，其特征在于所述第一DNA和第二DNA與至少一個啟動子可操作連接。

5.生產顯示對疫霉屬卵菌的抗性的馬鈴薯(Solanum tuberosum)轉基因植物的方法，包括以下步驟：

(i)產生轉化的第一親本植物，其含有穩定整合到所述親本植物基因組中的雙鏈的第一DNA，所述第一DNA包含

(a)SEQ ID NO:38的核苷酸序列，或

(b)SEQ ID NO:38的核苷酸序列的至少15個連續核苷酸的片段，或

(c)與(a)或(b)的核苷酸序列之一互補的核苷酸序列，或

(d)在嚴格條件下，與(a)、(b)或(c)的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；

(ii)產生轉化的第二親本植物，其含有穩定整合到所述親本植物基因組中的雙鏈的第二DNA，其中所述第一和第二DNA的編碼鏈的核苷酸序列彼此部分或完全地反向互補；

(iii)將所述第一親本植物與第二親本植物進行雜交；

(iv)選擇植物，其基因組中已經穩定整合有雙鏈的第一DNA和雙鏈的第二DNA，由此可以產生雙鏈RNA，以賦予針對疫霉屬卵菌的病原體抗性。

6.權利要求5的方法，其特征在于所述抗性是針對致病疫霉(Phytophthorainfestans)的抗性。

7.權利要求5的方法，其特征在于所述雙鏈RNA是miRNA或siRNA。

8.用于外部應用于植物的含有雙鏈RNA的組合物，其中所述RNA的鏈對應于雙鏈DNA的轉錄物，所述DNA包含

(a)SEQ ID NO:38的核苷酸序列，或

(b)SEQ ID NO:38的核苷酸序列的至少15個連續核苷酸的片段，或

(c)與(a)或(b)的核苷酸序列之一互補的核苷酸序列，或

(d)在嚴格條件下，與(a)、(b)或(c)的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。

9.權利要求8的組合物，用于賦予針對疫霉屬卵菌的抗性，尤其是針對致病疫霉的抗性。

10.馬鈴薯轉基因植物或其部分，其基因組中已經穩定整合有雙鏈的第一DNA和雙鏈的第二DNA，以賦予針對疫霉屬卵菌的病原體抗性，其中，所述第一和第二DNA的編碼鏈的核苷酸序列彼此完全或部分地反向互補，由此可以產生雙鏈RNA，其特征在于，所述第一DNA包含

(a)SEQ ID NO:1-43的核苷酸序列，或

(b)SEQ ID NO:1-43的核苷酸序列的至少15個連續核苷酸的片段，或

(c)與(a)或(b)的核苷酸序列之一互補的核苷酸序列，或

(d)在嚴格條件下，與(a)、(b)或(c)的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。

11.馬鈴薯轉基因植物或其部分，其基因組中已經穩定整合有雙鏈的第一DNA和雙鏈的第二DNA，以賦予針對疫霉屬卵菌的病原體抗性，其中，所述第一和第二DNA的編碼鏈的核苷酸序列彼此完全或部分地反向互補，由此可以產生雙鏈RNA，其特征在于，所述第一DNA包含

(a)SEQ ID NO:4、23、27、28的核苷酸序列的組合，或

(b)SEQ ID NO:4、23、27、28的核苷酸序列的至少15個連續核苷酸的片段的組合，或

(c)與(a)或(b)的核苷酸序列組合之一互補的核苷酸序列組合，或

(d)在嚴格條件下，與(a)、(b)或(c)的核苷酸序列組合雜交的核苷酸序列組合。