[發明專利]一種檢測H2O2的熒光探針及其制備方法

在審

• 申請號: 201810386917.8
• 申請日: 2018-04-26
• 公開（公告）號: CN108409791A
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 劉志鵬;陳登龍;白欣;劉金玲;陳嘉煉
• 申請（專利權）人: 福建師范大學泉港石化研究院
• 主分類號: C07F9/6561
• 分類號: C07F9/6561;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 泉州匯智興業知識產權代理事務所(普通合伙) 35237
• 代理人: 張永

本發明屬于過氧化氫分析檢測技術領域，具體涉及一種檢測H₂O₂的熒光探針及其制備方法，其結構式如圖所示，包括羅丹明衍生物和磷脂，一定量的羅丹明內酰胺與磷脂在一定條件下發生縮合反應得到目標化合物，合成過程原料簡單易得、反應條件溫和、操作簡單，所得檢測H₂O₂的熒光探針具有水溶性好、靈敏度高、光穩定性好、熒光量子產率高、波長長等優點，而且反應后的副產物不會對生物體產生危害，可廣泛應用于生物細胞及藥物合成。

技術領域

本發明屬于過氧化氫分析檢測技術領域，具體涉及一種檢測H₂O₂的熒光探針及其制備方法。

背景技術

過氧化氫是一種重要的活性氧物質，在生物機體活動和外界環境中有著極其重要的應用。在自然環境中，過氧化氫可以用來凈化自來水，在生物進行生命活動的時候，過氧化氫在細胞代謝過程中發揮著免疫標志的功能。生物新陳代謝過程中產生的過氧化氫(H₂O₂)是生命活動所必需的，過氧化氫在生理過程中有著重要作用。最近幾年的研究表明，過氧化氫可以以信號分子的角色對生理和病理過程進行調節，與細胞的增殖分化以及遷移過程息息相關，除此之外，過氧化氫在很多病理過程中例如炎癥、機體防御等方面也發揮著重要作用。但是很多疾病也是由于過量的過氧化氫而引起的，例如：癌癥、阿爾察默病等疾病。因此實時定量的檢測生物機體和外界環境中的過氧化氫具有非常重要的意義。

針對過氧化氫的檢測，現已有多種方式，包括氧化還原敏感熒光蛋白、納米管、超極化、超聲、質譜、PET、化學發光，以及過氧化氫反應性小分子熒光探針。值得注意的是，小分子熒光探針由于具有高敏感、對組織無損傷等特性，越來越引起研究人員的關注。然而，現有的市售的熒光探針，如二氯二氟熒光素、二氫羅丹明等，對ROS缺乏特異性。

為解決這個問題，Chang等(JAmChemSoc,2004,126:15392-15393.)報道了以熒光素為發光團，以硼酸酯基團作為熒光反應位點的熒光素類的雙硼酸酯熒光探針，該探針對過氧化氫的響應比其他活性氧化合物高500倍以上，可以檢測到人體胚腎細胞內微摩爾級的過氧化氫，反應機制如下。然而，芳基硼酸酯類探針對過氧化亞硝基陰離子(ONOO-)的反應活性高于過氧化氫，在生物體內脫靶反應嚴重，這一缺點限制了其廣泛應用。同時，該類探針反應后的副產物硼酸的生物學效應未知。

因此，為了解決熒光探針對ROS缺乏特異性，水溶性差等問題，設計合成對過氧化氫具有高度特異性，即選擇性好、靈敏度高、抗干擾能力強，同時，其反應后的產物可以對過氧化氫造成的氧化應激損傷起到一定的保護性效果的新型熒光探針具有重要的意義。

發明內容

為了解決熒光探針對ROS缺乏特異性，水溶性差等問題，本發明一種檢測H₂O₂的熒光探針及其制備方法。

一種檢測H₂O₂的熒光探針，其結構式如圖1所示。

進一步的，檢測H₂O₂的熒光探針結構式中基團R1，R2為烷基基團。

進一步的，檢測H₂O₂的熒光探針結構式中n為0，2，3，...n。

進一步的，制備上述的檢測H₂O₂的熒光探針，其合成方法如下：

合成羅丹明B內酰胺中間體：稱取2-3g羅丹明染料，將其溶于有機溶劑，接著將胺類化合物溶液逐滴加入到羅丹明溶液中，加熱至50-60℃，回流反應2-7h后得到羅丹明B內酰胺中間體；