[發明專利]一種不可逆羅丹明基ClO-熒光探針及其合成方法

在審

• 申請號: 201810386909.3
• 申請日: 2018-04-26
• 公開（公告）號: CN108640924A
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發明（設計）人: 陳登龍;白欣;劉金玲;陳嘉煉;劉志鵬;陳敏
• 申請（專利權）人: 福建師范大學泉港石化研究院
• 主分類號: C07D491/107
• 分類號: C07D491/107;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 泉州匯智興業知識產權代理事務所(普通合伙) 35237
• 代理人: 張永

本發明屬于生物細胞診斷領域，具體涉及一種不可逆羅丹明基ClO^?熒光探針及其合成方法，其結構式如圖所示，包括靈敏度高、光穩定性好、熒光量子產率高、波長長的羅丹明熒光團，一定量的羅丹明內酰胺與在一定條件下發生縮合反應得到特殊結構的不可逆羅丹明基ClO^?熒光探針，合成過程原料簡單易得，反應條件溫和，操作簡單，同時所得羅丹明熒光探針能夠在水環境下快速檢測生物細胞內ClO^?，不受其他離子干擾，對ClO^?的結合屬于反應型識別，具有不可逆性。

技術領域

本發明屬于生物細胞診斷領域，具體涉及一種不可逆羅丹明基ClO^-熒光探針及其合成方法。

背景技術

近年來，對環境、生物體系內乃至醫藥方面無機陰離子的檢測備受矚目。無機陰離子中活性氧類化合物在生理過程和病理過程起重要作用。次氯酸根(ClO^-)是一種常見的非親核性氧化劑，是工業和日常生活中廣泛使用的清潔劑和抗菌劑的主要成分，也是生物體免疫系統最關鍵的活性氧物種(ROS)。在生命體內，次氯酸根(ClO^-)參與了細胞內氧化還原反應和多種信號傳導過程，包括血管舒張、心肌收縮、神經傳遞和胰島素分泌等。而當細胞內次氯酸根(ClO^-)處于非正常水平時將導致一系列生理疾病，例如關節炎、神經衰弱和癌癥等。因此，有效地檢測或監控生物樣品或環境樣品中的次氯酸根(ClO^-)已成為近年來相關領域的研究熱點。

傳統的次氯酸根檢測方法，有高效液相色譜法、質譜法、電化學法、原子吸收光譜法、電子耦合等離子體原子發射光譜法等，但這些方法存在儀器昂貴、耗時耗力等缺點。而熒光檢測法由于其靈敏度高和選擇性好，成為一種被廣泛應用于實時檢測并能夠對一些生物體系內重要的物種進行成像檢測的方法。它能夠提供這些物種在細胞、組織甚至活體中的動態信息，比如一些生物分子的分布和分布的量。羅丹明類化合物具有水溶性好，光穩定性好，熒光量子產率高，波長長等優點，被廣泛用于環境檢測和生物細胞成像。

目前已開發的用于檢測次氯酸根(ClO^-)的小分子熒光探針主要基于次氯酸根(ClO^-)與還原性官能團之間的特異性化學反應而設計的。當存在次氯酸根(ClO^-)的條件下，探針分子中的還原性官能團(如：硫醚，硒醚，肟，亞胺等)被次氯酸根(ClO^-)氧化為高價態原子(如硫醚和硒醚等)或是發生鍵的斷裂(如：肟，亞胺等等)，導致探針分子的熒光性質發生變化，從而實現對次氯酸根(ClO^-)的特異性設別。目前大多數傳感器的合成都比較復雜，不利于實際應用。因此，需要發展一種簡單易行的新方法來實現對次氯酸根的高效檢測。

如專利號CN201510005551.1公開了一種次氯酸根離子熒光探針、制備方法及其應用，其可用于環境中次氯酸根離子含量的檢測以及次氯酸根在生物樣本中分布的熒光顯影及含量檢測。本發明熒光探針僅次氯酸根有熒光響應，對其他各種活性氧物種(ROS)包括H₂O₂、NO·、·O^2-、ONOOˉ、ROO·、¹O₂、·OH均無反應，具有很好的選擇性和特異性，所述探針制備工藝簡單易行，易于規模化生產，但是未具體表明所述探針的檢測限，其靈敏度無法獲知。

專利號CN201711041751.8公開了一種熒光探針分子及其合成方法和在次氯酸根離子檢測中的應用。上述熒光探針分子，加入含次氯酸根離子的測試樣品中，測試樣品的顏色發生明顯變化，并且其對次氯酸根離子的選擇性好，且可以穩定地響應次氯酸?？刹捎猛ㄟ^測量不同波段的熒光光強比來計算次氯酸根離子的濃度，該測試過程無需進行復雜的理化測試方法，具有操作簡單、快速高效、靈敏度高的優勢，但是所述探針的合成步驟復雜，產生的副反應多，雜質多，不利于純化。