[發明專利]植物油中縮水甘油酯的檢測方法

在審

• 申請號: 201810383602.8
• 申請日: 2018-04-26
• 公開（公告）號: CN108732282A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發明（設計）人: 王月華;劉玉蘭;王秀華;畢小蘭;王萍;程芳園;謝夢嬌
• 申請（專利權）人: 山東三星玉米產業科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 耿霞

本發明屬于食用油檢測技術領域，具體的涉及一種植物油中縮水甘油酯的檢測方法。通過開環反應、水解反應、凈化反應和樣品的衍生步驟提取出植物油中的縮水甘油酯，然后采用氣相色譜?質譜法對縮水甘油酯的含量進行檢測；氣相色譜?質譜法檢測時色譜檢測條件為：色譜柱為30m×0.25mm×0.25um的HP?5MS柱，色譜柱升溫程序為85℃保持12min，以20℃/min速度升至165℃，保持10min，再以20℃/min的速度升至300℃，并保持8min。本發明建立的檢測玉米油中縮水甘油酯的氣相色譜?質譜法，通過對儀器條件和前處理方法的優化，顯著提高檢測方法的靈敏度，檢測方法簡單快捷，穩定可靠。

技術領域

本發明屬于食用油檢測技術領域，具體的涉及一種植物油中縮水甘油酯的檢測方法。

背景技術

縮水甘油酯被發現存在于食物油脂中，是潛在的不安全因素。縮水甘油酯是一種工業化學品，具有基因毒性，使用后能引發惡性腫瘤的形成，縮水甘油酯在植物油中存在量比較小，具有一定的熱不穩定性。國外對動植物油脂及含動植物油脂的食品中縮水甘油酯的研究逐漸增多，但國內尚未有關于油脂中縮水甘油酯研究的報道，大部分研究的目的是建立一個有效的縮水甘油酯的檢測方法，以便于深入地研究縮水甘油酯的形成機理及采取相應的措施以減少食用油脂中縮水甘油酯的含量。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種植物油中縮水甘油酯的檢測方法。該方法操作簡單，精確度高,安全性高且經濟實惠。

本發明所述的植物油中縮水甘油酯的檢測方法是通過開環反應、水解反應、凈化反應和樣品的衍生步驟提取出植物油中的縮水甘油酯，然后采用氣相色譜-質譜法對縮水甘油酯的含量進行檢測；氣相色譜-質譜法檢測時色譜檢測條件為：色譜柱為30m×0.25mm×0.25um的HP-5MS柱，進樣口溫度為250℃，色譜柱升溫程序為85℃保持12min，以20℃/min速度升至165℃，保持10min，再以20℃/min的速度升至300℃，并保持8min；載氣為氦氣，不分流進樣體積為1.0uL，流量1ml/min。

其中：

開環反應：向植物油中加入內標物溶液、甲基叔丁基醚渦旋后加入溴化鈉的酸性水溶液，渦旋后將混合物在45℃-55℃下恒溫水浴10min-20min，加入碳酸氫鈉溶液以終止反應，往樣品中加入正己烷渦旋，離心分離，將上層轉移至干凈的玻璃管中，30℃-40℃氮氣吹至干并用甲基叔丁基醚復溶。

水解反應：向開環反應得到的復溶溶液中加入硫酸與甲醇的混合溶液，渦旋至溶解，然后在39-41℃溫度下反應16h-17h，反應完后，往樣品溶液中加入飽和碳酸氫鈉溶液，以終止反應，30℃-40℃溫度下氮氣吹至1ml-1.5ml，得到待凈化液。

其中硫酸與甲醇的混合溶液為用移液管吸取1.8ml硫酸至100ml容量瓶中并用甲醇定容至刻度線。

凈化反應：向水解反應得到的待凈化液中加入硫酸鈉溶液和正己烷并混合，1200r-1250r離心2min-3min，分層后棄去正己烷，并用正己烷重復洗滌一次后將正己烷棄去；然后往水相層加入乙酸乙酯與乙醚的混合溶液，進行離心，將上層溶液轉至裝有無水硫酸鎂的離心管中，重復提取三次，得到凈化反應提取液。

樣品的衍生：向凈化反應提取液中加入苯基硼酸溶液，渦旋10s-15s，靜置5min-6min，30℃-40℃下氮氣吹至全干，然后加入正己烷復溶，渦旋10s-15s至充分溶解，立即用濾膜過濾轉移至氣相色譜-質譜進樣小瓶。

開環反應中的內標物溶液為色譜純級異丙醇。

采用氣相色譜-質譜法對植物油中縮水甘油酯的含量進行檢測，具體包括以下步驟：

(1)標線建立