[發(fā)明專利]一種高通量原位雜交儀及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810383552.3
• 申請日: 2018-04-25
• 公開（公告）號: CN110396468A
• 公開（公告）日: 2019-11-01
• 發(fā)明（設計）人: 丁曉昆;丁勃
• 申請（專利權）人: 寧波吉聚生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548
• 代理人: 李靜

本發(fā)明公開了一種高通量原位雜交儀，包括雜交儀本體以及設置在雜交儀本體內(nèi)的加熱板，所述加熱板上可拆卸的連接有用于原位雜交反應的多孔板，所述多孔板設置有多個互相獨立間隔的反應孔，且多孔板的底部外緣向下延伸形成有定位吸合結構，所述定位吸合結構包括從多孔板底部向下依次延伸的硬質(zhì)環(huán)板以及伸縮環(huán)壁，伸縮環(huán)壁的底部設置有一圈密封底座，所述硬質(zhì)環(huán)板上設置有流通方向為由硬質(zhì)環(huán)板圍合而成的內(nèi)腔向外界單向流通的單向閥孔，當多孔板放于加熱板上時，定位吸合結構的密封底座貼合于加熱板上，并且向下按壓多孔板時，所述伸縮環(huán)壁壓縮并將由伸縮環(huán)壁和加熱板圍合而成的空間內(nèi)的空氣由單向閥排出，使得多孔板與加熱板之間形成吸合。

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，更具體地說，它涉及一種高通量原位雜交儀及方法。

背景技術

原位雜交是一門新興的分子細胞遺傳學技術。其原理是：根據(jù)核酸堿基互補配對原理，用半抗原標記DNA或者RNA探針與經(jīng)過變性的單鏈核酸序列互補配對，通過帶有熒光基團的抗體去識別半抗原進行檢測，或者用熒光基團對探針進行直接標記并與目標序列結合，最后利用熒光顯微鏡直接觀察目標序列在細胞核、染色體或切片組織中的分布情況。目前這項技術已經(jīng)廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。

原位雜交技術主要包括以下幾個步驟：(1)樣本玻片的制備；(2)樣本玻片的預處理；(3)探針與樣本的變性和雜交；(4)玻片洗滌；(5)結果觀察。為了完成FISH的雜交試驗，很多實驗室通常選擇熒光原位雜交儀。一般的原位雜交儀包括變性/雜交、雜交和固定溫度等幾個操作模式。這些雜交儀在進行原位雜交試驗時，使用成本很高。而且一臺原位雜交儀最大能檢測12個樣本，當樣本量過多時需要配置更多的熒光原位雜交儀或調(diào)整實驗步驟，極大地增加了實驗室的負擔。

目前，國內(nèi)外科研機構和大型醫(yī)療單位廣泛使用的原位雜交儀存在下列問題：

1)單次檢測樣品數(shù)量較少，即通量低(12個樣品/次)；

2)每份樣品的試劑用量較大；

3)雜交液容易干枯，影響雜交實驗結果。

因此，在一定程度上限制了用組織原位雜交儀進行基因檢測的應用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的是提供一種能夠根據(jù)需求，實現(xiàn)大批量樣本的一次性檢測的高通量原位雜交儀。

為實現(xiàn)上述第一目的，通過以下技術手段實現(xiàn)：一種高通量原位雜交儀，包括雜交儀本體以及設置在雜交儀本體內(nèi)的加熱板，所述加熱板上可拆卸的連接有用于原位雜交反應的多孔板，所述多孔板設置有多個互相獨立間隔的反應孔，且多孔板的底部外緣向下延伸形成有定位吸合結構，所述定位吸合結構包括從多孔板底部向下依次延伸的硬質(zhì)環(huán)板以及伸縮環(huán)壁，伸縮環(huán)壁的底部設置有一圈密封底座，所述硬質(zhì)環(huán)板上設置有流通方向為由硬質(zhì)環(huán)板圍合而成的內(nèi)腔向外界單向流通的單向閥孔，當多孔板放于加熱板上時，定位吸合結構的密封底座貼合于加熱板上，并且向下按壓多孔板時，所述伸縮環(huán)壁壓縮并將由伸縮環(huán)壁和加熱板圍合而成的空間內(nèi)的空氣由單向閥排出，使得多孔板與加熱板之間形成吸合。

進一步優(yōu)化為：所述加熱板上形成有向內(nèi)凹陷且與密封底座配合定位的定位凹槽，當多孔板放于加熱板上時，所述密封底座放置于定位凹槽內(nèi)形成多孔板和加熱板之間的相對定位。

進一步優(yōu)化為：在定位凹槽底部設置有一圈向內(nèi)凹陷的讓位環(huán)槽，當多孔板放置于加熱板上時，所述密封底座陷入所述讓位環(huán)槽內(nèi)，且壓縮所述伸縮環(huán)壁之后，所述硬質(zhì)環(huán)板的下側(cè)面與定位凹槽的底面平齊。