[發明專利]抗氧化多肽DR8在制備治療肺臟纖維化藥物中的應用

在審

• 申請號: 201810382800.2
• 申請日: 2018-04-26
• 公開（公告）號: CN108465103A
• 公開（公告）日: 2018-08-31
• 發明（設計）人: 王銳;謝俊秋;張邦治;蔣先興;閆志斌;王丹
• 申請（專利權）人: 蘭州大學
• 主分類號: A61K38/08
• 分類號: A61K38/08;A61P11/00
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 陶濤

本發明提供了一種抗氧化多肽DR8的醫藥新用途——在制備治療肺臟纖維化藥物中的應用，屬于生物醫藥技術領域。體外肺上皮細胞相關實驗與體內肺纖維化模型小鼠給藥實驗表明，DR8能夠有效抑制肺臟纖維化的發生發展，具有抗肺臟纖維化作用，且細胞毒性低，因此，可以DR8為活性成分，采用藥劑學常規工藝和輔料，制備成治療肺臟纖維化的凍干粉劑和腸溶衣制劑、微球、微囊、毫微球、脂質體、納米粒、微乳制劑等各種口服制劑，具有很好的臨床應用價值。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體是一種具有抗氧化作用的多肽DR8在制備治療肺臟纖維化藥物中的應用。

背景技術

肺纖維化(Pulmonary fibrosis, PF)是一種以彌漫性、進行性肺間質纖維增生和肺泡結構紊亂導致的肺功能障礙為特征的呼吸系統疾病。肺纖維化的發生與多種疾病相關，具有高發病率和高死亡率且預后差的特點。確診后患者的平均生存時間為2.5-3.5年，近年來其發病呈逐年上升趨勢，對人類的健康和危害極大（J. Pneumologia. 2003, 29:1-5; Toxicol Appl Pharmacol. 2015, 286:188-197）。

由于肺纖維化的發病機制尚未明確，因此缺乏有效的治療手段。目前肺纖維化的治療多采用糖皮質激素、免疫抑制劑、免疫調節劑等，但其臨床療效并不顯著，且具有一定不良反應。吡非尼酮（PFD）是目前唯一被批準可用于肺纖維化臨床治療的藥物，通過調節或抑制與纖維化疾病相關的重要因子如成纖維細胞生長因子 （bFGF）、轉化生長因子-β（TGF-β）、結締組織生長因子（CTGF）和金屬蛋白酶組織抑制劑 1（TIMP-1）等的表達，抑制成纖維細胞的生物學活性，減少細胞增殖和基質膠原合成，同時還可抑制炎性介質分泌、減少脂質過氧化等，發揮抗炎和抗氧化作用。但PFD副作用大，且半衰期非常短。1987年Cantin等首次發表了關于肺纖維化中氧化應激的研究報告，提示氧化/抗氧化失衡可能在肺纖維化發病機制中發揮重要作用：氧化劑能夠引起炎癥因子基因表達與合成釋放，導致炎癥損傷；活性氧（ROS）能刺激多種細胞表達和分泌TGF-β，進而活化成纖維細胞；ROS介導肺泡上皮細胞凋亡，且成纖維細胞及肌成纖維細胞調亡不足，導致細胞外基質（ECM）沉積，最終導致肺纖維化形成（Eur J Cancer. 2002, 38 Suppl 5:S28-36）。

DR8（DHNNPQIR）是Xu等2017年報道的從菜籽蛋白中分離提取的抗氧化多肽，通過增強谷胱甘肽過氧化物酶活性清除自由基，從而減輕自由基對機體的損傷，并且可以清除細胞內活性氧（ROS），對易過氧化的脂質起保護作用，從而發揮抗氧化活性（J Agric FoodChem. 2017, 65:2056-2065）。

發明內容

本發明的目的是提供一種抗氧化多肽DR8的醫藥新用途，即在制備治療肺臟纖維化藥物中的應用。

本發明通過動物實驗與細胞實驗，在細胞和分子水平分別通過一系列實驗證實了抗氧化多肽DR8在治療肺臟纖維化中的藥理學活性。

一、動物實驗

1. 小鼠建模與給藥

用博來霉素（BLM）誘導構建小鼠肺纖維化模型：

雌性C57BL/6小鼠，8周齡，體重為18-20g，將小鼠按隨機分組法分為4組，每組8-10只，分別為對照組、生理鹽水組、博來霉素模型組、DR8給藥組。