[發明專利]用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810382640.1
• 申請日: 2018-04-25
• 公開（公告）號: CN108707558A
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 謝悅波;陳求穩;何慶成;金波;姚竣耀
• 申請（專利權）人: 江蘇世邦生物工程科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/38;C12R1/25;C12R1/125
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王艷

1.一種用于修復重金屬污染土壤的微生物復合制劑，其特征在于，該復合微生物菌劑包括沼澤紅假單胞菌 DSM5859菌劑、植物乳桿菌NJ2205菌劑、枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑和固定化耐高溫α-淀粉酶。

2.根據權利要求1所述的用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑，其特征在于，所述沼澤紅假單胞菌 DSM5859菌劑、植物乳桿菌NJ2205菌劑、枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑重量比為0.5：1：1~2：3：5。

3.根據權利要求1所述的用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑，其特征在于，所述復合微生物菌劑中，所述沼澤紅假單胞菌 DSM5859菌劑的活菌含量為1×10⁸~5×10¹⁰ cfu/g，植物乳桿菌NJ2205菌劑菌劑的活菌含量為3×10⁹~8×10¹⁰ cfu/g、所述枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑4×10⁹~7×10¹⁰ cfu/g。

4.根據權利要求1所述的用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑，其特征在于，所述復合微生物菌劑中，所述固定化耐高溫α-淀粉酶濃度為15~30U/mg。

5.一種制備權利要求1~4中任意一項所述的用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1）將沼澤紅假單胞菌 DSM5859菌劑、植物乳桿菌NJ2205菌劑、枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑按照0.5：1：1~2：3：5的質量比混合均勻得到復合菌劑；

2）向步驟1）制得的復合菌劑中加入所述固定化耐高溫α-淀粉酶，混合均勻，即得所述用于修復重金屬污染的土壤的微生物制劑。

6.根據權利要求5所述的制備用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑的方法，其特征在于，所述沼澤紅假單胞菌 DSM5859菌劑的制備方法包括：將沼澤紅假單胞菌 DSM5859培養到對數期，然后按培養基體積3%~6%的接種量將培養到對數期的菌種接種到培養基中，30~35℃下，搖床震蕩180~220rpm，培養48~72小時，得到沼澤紅假單胞菌 DSM5859的發酵液，向該發酵液中加入吸附劑，干燥，即得沼澤紅假單胞菌 DSM5859菌劑；所述吸附劑為膨潤土或活性炭一種或幾種。

7.根據權利要求6所述的制備用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑的方法，其特征在于，所述培養基為酵母膏、乙酸鈉、MgSO₄、K₂HPO₄、蛋白胨、蛋氨酸配制而成的培養基。

8.根據權利要求5所述的所述的制備用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑的方法，其特征在于，所述植物乳桿菌NJ2205菌劑的制備方法包括：將植物乳桿菌NJ2205培養到對數期，然后按培養基體積3%~6%的接種量將培養到對數期的菌種接種到LB液體培養基中，35~37℃下，搖床震蕩150~220rpm，培養36~48小時，加入吸附劑，干燥，制得植物乳桿菌NJ2205菌劑；所述吸附劑為膨潤土或活性炭中的一種或幾種。

9.根據權利要求5所述的所述的制備用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑的方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑的制備方法包括：將枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑培養到對數期，然后按培養基體積6%~10%的接種量將培養到對數期的菌種接種到LB液體培養基中，30~35℃下，搖床震蕩120~150rpm，培養36~48小時，加入吸附劑，干燥，制得枯草芽孢桿菌BNCC188062菌劑；所述吸附劑為膨潤土或活性炭中的一種或幾種。

10.權利要求1~4中任意一項所述的用于修復重金屬污染土壤的微生物制劑的方法在重金屬污染土壤修復中的應用。