[發明專利]一種提高蘇尼特羊產羔數的單倍型遺傳標記及其應用

在審

• 申請號: 201810373754.X
• 申請日: 2018-04-24
• 公開（公告）號: CN109504781A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 李光鵬;佟彬;王嘉鵬;白春玲;劉志剛;呂菲菲
• 申請（專利權）人: 內蒙古大學;內蒙古小黑頭羊牧業有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858
• 代理公司: 北京律遠專利代理事務所(普通合伙) 11574
• 代理人: 全成哲

本發明公開了利用GDF9基因提高蘇尼特羊繁殖力的方法，由于?332、?534和?779三個位點連鎖不平衡，本方法利用PCR方法擴增蘇尼特羊GDF9基因GenBank Accession Number為NC_019462的41771049到41771267位點核苷酸的片段(?534位點)，并將擴增產物進行RFLP檢測，若能在只214bp位置出現條帶證明基因型為CC，如果在214bp、129bp和85bp處同時出現條帶證明為雜合體基因型CT，如果在只129和85bp處出現條帶則證明基因型為TT；CT(?332位點)、AG(?534位點)和CT(?779位點)基因型蘇尼特羊的繁殖力高于所述CT(?332位點)、AA(?534位點)和CC(?779位點)基因型蘇尼特羊。本發明利用PCR?RFLP迅速、簡便的檢測單倍型遺傳標記多態性,為利用分子標記輔助育種技術提高蘇尼特羊繁殖力，提供了一個準確簡便的方法。

技術領域

一種提高蘇尼特羊產羔數的單倍型遺傳標記及其應用。

背景技術

GDF9(growth differentiation factor 9，GDF9)即生長分化因子9，與BMP15基因同屬于轉化生長因子β(TGFβ)超家族成員。綿羊的GDF9基因位于到5號染色體上，全長約2.5kb，其中包含2個外顯子和1個內含子，外顯子1長397bp，編碼134個氨基酸，外顯子2長968bp，編碼456個氨基酸，內含子長1126bp。(Sadighi M,Bodensteiner K J,Beattie A E etal.Genetic mapping of ovine growth differentiation factor 9(GDF9)to sheepchromosome 5.[J].Animal Genetics,2002,33(3):244-245.)。

蘇尼特羊產于內蒙古自治區錫林郭勒盟蘇尼特左旗和蘇尼特右旗，有戈壁羊之稱。其主要飼養方式為純天然牧場自然放牧，氣候特點為春季干旱多風、夏季炎熱、冬季寒冷，主要飼養植物種類有沙蔥、多根蔥、小型針茅草等多達477種。蘇尼特羊有很強的適應能力，在終年放牧不補任何伺料的條件下都能很快抓膘，而且肌肉豐滿，體格壯大，肉質細嫩，無膻味，口感好，有較高的產肉性能。蘇尼特羊肉富含人體所需要的各種氨基酸、脂肪酸、礦物質、維生素等，且蛋白質含量高、脂肪含量低，因此在國內外非常受歡迎。1986年蘇尼特羊被錫林郭勒盟技術監督局批準為地方良種，1997年被內蒙古自治區人民政府正式命名為蘇尼特羊，在2010年被列入全國優良畜種名錄，2015年被列入國家級畜禽遺傳保護名錄。(高鳳明，白乙爾圖，劉金，孫彥軍，邵志勇。蘇尼特羊及羊肉的品質與營養。[J]中國畜牧獸醫文摘， 2014，30(12)：43-44.)。

李碧俠等用PCR-SSCP技術分析了GDF9基因在小尾寒羊、湖羊、多賽特和薩福克4個綿羊品種的多態性，結果表明在湖羊、多賽特和薩福克羊GDF9基因外顯子1編碼區152bp處發生了A→G的突變，導致第51位氨基酸由天冬酰胺變為天冬氨酸，小尾寒羊沒有發生該突變。(李碧俠，儲明星，王金玉。綿羊GDF9基因PCR-SSCP分析。[J]遺傳學報，2003，30(4)： 307-310.)。