[發(fā)明專利]一種血液樣本RNA提取的試劑及提取方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810373195.2
• 申請日: 2018-04-24
• 公開（公告）號: CN108277219A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張炳強
• 申請（專利權(quán)）人: 青島瑞思德生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11548
• 代理人: 李靜

本發(fā)明公開了一種血液樣本RNA提取的試劑及提取方法，包括以下重量份數(shù)的原料：芐基縮水甘油醚2?8份、異佛爾酮二胺1?5份、甘氨酸1?5份、異丙醇5?10份、十二烷基肌氨酸鈉5?10份、去離子水100?200份，本發(fā)明成本低廉，操作簡便，大大減少了操作時間，簡化了操作步驟，降低了工作人員的勞動強度，利用本方法可以降低雜質(zhì)含量、提高產(chǎn)物純度，提純效率更高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種血液樣本RNA提取的試劑及提取方法。

背景技術(shù)

RNA是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補配對原則，轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈，主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達，是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。

轉(zhuǎn)運RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進行翻譯的mRNA結(jié)合，而后核糖體RNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子，核糖核酸，存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。

近年來，在基因研究的相關(guān)技術(shù)中，作為生物體內(nèi)重要遺傳物質(zhì)，RNA已越來越多的成為被研究的對象。RNA的提取是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)，然而現(xiàn)有的RNA提取過程操作復(fù)雜，提取時間較長，十分不便。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種血液樣本RNA提取的試劑及提取方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種血液樣本RNA提取的試劑，包括以下重量份數(shù)的原料：芐基縮水甘油醚2-8份、異佛爾酮二胺1-5份、甘氨酸1-5份、異丙醇5-10份、十二烷基肌氨酸鈉5-10份、去離子水100-200份。

作為本發(fā)明進一步的方案：包括以下重量份數(shù)的原料：芐基縮水甘油醚5份、異佛爾酮二胺3份、甘氨酸2份、異丙醇8份、十二烷基肌氨酸鈉8份、去離子水150份。

一種血液樣本RNA的提取方法，包括以下步驟：（1）將血液樣本15份放入離心機離心20min，離心完成后提取全血細胞，備用；（2）將芐基縮水甘油醚、十二烷基肌氨酸鈉與去離子水混合，攪拌20min，得到混合液；（3）將混合液與全血細胞混合，震蕩，水浴加熱1h，加熱溫度為55-60℃，靜置2h得到混合樣本；（4）將異佛爾酮二胺、甘氨酸加入混合樣本中，微波震蕩20min，再放入離心機內(nèi)離心30min，取上清液；（5）向上清液中加入異丙醇，攪拌5-10min，靜置2-4h，過濾得到RNA沉淀物。

作為本發(fā)明進一步的方案：步驟（1）中，離心轉(zhuǎn)速為2500r/min。

作為本發(fā)明更進一步的方案：步驟（3）中，加熱溫度為58℃。 作為本發(fā)明更進一步的方案：步驟（5）中，攪拌時間為8min。

作為本發(fā)明更進一步的方案：步驟（5）中，靜置時間為3h。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明成本低廉，操作簡便，大大減少了操作時間，簡化了操作步驟，降低了工作人員的勞動強度，利用本方法可以降低雜質(zhì)含量、提高產(chǎn)物純度，提純效率更高。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本專利的技術(shù)方案作進一步詳細地說明。

實施例1

一種血液樣本RNA提取的試劑，包括以下原料：芐基縮水甘油醚2-8g、異佛爾酮二胺1-5g、甘氨酸1-5g、異丙醇5-10g、十二烷基肌氨酸鈉5-10g、去離子水100-200g。