[發明專利]一類通過質粒載體介導的基因治療重組載體

有效

• 申請號: 201810371281.X
• 申請日: 2018-04-24
• 公開（公告）號: CN108611367B
• 公開（公告）日: 2019-11-19
• 發明（設計）人: 聶李亞;馬素永;徐宏偉;馬杉姍;湯曉闖;梁明征
• 申請（專利權）人: 北京諾思蘭德生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/62;A61K48/00;A61P9/10
• 代理公司: 11038 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 楊棽;李程達<國際申請>=<國際公布>=

一類通過質粒載體介導的基因治療重組載體本發明涉及生物制藥領域，具體地說是涉及一種可高效表達人肝細胞生長因子的重組載體及其應用。本發明還涉及含有構建的增強信號肽提高蛋白表達量的藥物及其組合物用于制備治療下肢動脈缺血性疾病的用途。

技術領域

本發明為生物制藥領域，具體地說是涉及一種可高效表達人肝細胞生長因子的重組載體及其應用。

背景技術

缺血性疾病尤其是動脈缺血性疾病主要包括冠心病和肢體動脈硬化性閉塞癥，其主要病因是動脈硬化。動脈硬化使血管內壁有脂肪、膽固醇等沉積，并伴隨著纖維化與鈣化等病變，逐漸造成血管管腔狹窄，血流供應不足，引起動脈缺血性疾病。世界衛生組織指出，目前全球每年有1700萬人死于心臟病和其他心血管疾病，約占全球死亡人數的三分之一，其發病率和死亡率呈逐年上升趨勢，預計到2020年這個數字將有可能突破2000萬，現已成為危害人類健康的嚴重疾病。美國一項調查表明，心臟病占總死因的35%，其中冠心病死亡占24.1%，居前10位死因之首。八十年代以來，我國心血管病發病率和死亡率呈逐年上升趨勢。據1984年報告，冠心病死亡粗率：城市為36.9/10萬，農村為15.6/10萬；而外周動脈缺血性疾病主要包括下肢動脈硬化性閉塞癥、血栓閉塞性脈管炎、糖尿病肢體動脈閉塞癥等，其主要癥狀為患肢乏力，疼痛，“間歇足性跛行”，持續性的靜息痛，肌肉萎縮，出現潰瘍或壞死，久治不愈，最后不得不截肢。在美國70歲以上人群中發病率為10%；目前每年約有10萬人次接受治療。在我國，本病已成為中老年人常見的周圍血管閉塞性疾病。50歲以上人口的發病率為0.74%，每年有200萬人患病。據美國匹茲堡大學醫學中心研究顯示，缺血性間歇性跛行患者10年累積截肢率<10%，10年累積手術血管重建率為18%，靜息痛和缺血性潰瘍發生率分別為23%和30%，危重肢體缺血患者１年病死率約為20%。

血管缺血性疾病共同的臨床特點是痛苦難忍、療程長、治療難度大、治療費昂貴，致殘率和死亡率高等，嚴重影響患者的健康和正常生活工作。但是，目前對血管缺血性疾病尚無有效的治療藥物和方法，主要借助冠心病和外周血管的外科和介入治療，如血管搭橋術，球囊成形術；支架術；射頻消融術；心臟起搏術；激光血管成形術，動脈斑塊切術，定向血管內膜斑塊切除術，血栓抽吸術，冠狀動脈內旋磨術，超聲血管成形術等。但這些方法受嚴格的適應癥限制，并發癥多，預后差，有待于進一步研究和完善，尤其對血管病變數量和范圍較大的疾病仍無法實施治療。因此，臨床上迫切需要安全而有效的新的治療方法。

1982 年Michalopoulos等命名一種能刺激原代培養的肝細胞生長和脫氧核糖核酸(DNA)合成的肝源性因子為肝細胞生長因子(簡稱HGF)（Liver regeneration studieswith rat hepatocytes in primary culture.Cancer Res , 1982, 42 :4673-4682），1993 年Grant 等證實HGF在體內具有促血管新生作用（Scatter factor induces bloodvessel formation in vivo.Proc Natl Acad Sci USA, 1993, 90:1937-1941）。

由于HGF蛋白質本身體內的半衰期很短（HGF抗腎臟纖維化機制的研究進展，國外醫學生理病理科學與臨床分冊，2005年，第25卷第3期），因此使用HGF蛋白治療疾病，出現反復給藥和用藥量過多等問題。根據缺血性疾病的臨床特征，大家開始考慮采用基因治療的方法來使得HGF能直接、方便地應用到臨床疾病的治療。