[發(fā)明專利]半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810371123.4
• 申請日: 2018-04-24
• 公開（公告）號: CN108727499B
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發(fā)明（設計）人: 朱義;王一茜;卓識;李杰;陳瀾;余永國;萬威李
• 申請（專利權）人: 四川百利藥業(yè)有限責任公司;成都百利多特生物藥業(yè)有限責任公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;A61K47/68;A61K31/704;A61K31/4745;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物（TDC）具有通式：2C2-HC-S252C-mc-vc-PAB-payload，

其中2C2是目標抗體重鏈kabat編碼252位絲氨酸S改造為半胱氨酸C后的抗體；2C2輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列為SEQ ID NO:2，重鏈氨基酸序列為SEQ ID NO:6；

其中Payload選自MMAE、MMAF、PBD、SN-38、Dox，分子式為：

、

、

、

、。

2.權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物，其中mc-vc-PAB-OH連接子為：

。

3.權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物，其中毒素比抗體比例DAR為1.6-2.0。

4.權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物，mc-vc-PAB連接子與抗體進行定點偶聯(lián)的位點氨基酸序列為：LLGGPCVFLFP，其中，C為目標抗體重鏈kabat編碼252位絲氨酸改造的半胱氨酸。

5.權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物，2C2抗體選自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。

6.權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物，2C2抗體輕鏈保守區(qū)選自kappa和lamda序列。

7.一種如權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物用于制備抗腫瘤藥物的用途，所述腫瘤為表達EGFRvIII及過表達EGFRwt的腫瘤。

8.如權利要求7所述的用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于：所述腫瘤為腦膠質癌、非小細胞肺癌、頭頸癌、結直腸癌、膀胱癌、腎癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌。

9.一種權利要求1所述的半胱氨酸改造的抗體-毒素偶聯(lián)物的制備方法，其特征在于：首先使用DTT還原抗體，解除抗體上改造的半胱氨酸殘基上的屏蔽，并通過陽離子交換層析去除DTT與屏蔽物；

然后使用DHAA氧化抗體，使抗體的鏈間二硫鍵重新連接；

最后加入mc-vc-PAB-payload與抗體改造的半胱氨酸殘基偶聯(lián)，并通過陽離子交換層析去除未偶聯(lián)上抗體分子的mc-vc-PAB-payload。