[發(fā)明專(zhuān)利]用于慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)的標(biāo)志物及試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810369230.3
• 申請(qǐng)日: 2018-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108929903B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾今誠(chéng);蔡樹(shù)玉;梁艷芳;林曉悅;林碧華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 東莞市第五人民醫(yī)院(東莞市太平人民醫(yī)院);廣東醫(yī)科大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883;G01N33/68
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了用于慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)的標(biāo)志物及試劑盒。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了與慢性牙周炎診斷及中重度病程分類(lèi)相關(guān)的分子標(biāo)志物，包括p19mRNA、p40mRNA、p35mRNA、EBI3mRNA，并且定量檢測(cè)分子標(biāo)志物及其組合，可用于診斷慢性牙周炎，故有望將上述標(biāo)志物用于制備慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)試劑盒中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，更具體地，涉及慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)的標(biāo)志物及試劑盒。

背景技術(shù)

牙周炎是牙周細(xì)菌感染，導(dǎo)致牙周附著組織和牙槽骨破壞，而引起的慢性非特異性感染性疾病。目前在世界各地范圍內(nèi)牙周炎均有較高的發(fā)病率和患病率，全世界5～20％成年人患有重度牙周炎，而兒童及未成年人牙周炎類(lèi)型多樣，主要以侵襲性牙周炎，慢性牙周炎(Chronic periodontitis，CP)及各種系統(tǒng)性疾病并發(fā)的牙周炎為主。牙周炎危害極大，導(dǎo)致牙周組織炎癥、牙周袋形成，進(jìn)行性附著喪失和牙槽骨質(zhì)吸收，最終發(fā)生牙齒松動(dòng)導(dǎo)致牙拔除。

目前臨床上對(duì)牙周炎嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)指標(biāo)主要有：牙周探診深度(PD)、齦溝出血指數(shù)(SBI)和X線(xiàn)等，然而這些指標(biāo)均只能代表單一病變的最終結(jié)果，并不能及時(shí)準(zhǔn)確地表明牙周炎的發(fā)生、發(fā)展變化。在牙周炎的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，除細(xì)菌微生物感染外，宿主的免疫調(diào)節(jié)作用也尤為重要，尤其是細(xì)胞因子參與的免疫調(diào)節(jié)作用。細(xì)胞因子是由活化的免疫細(xì)胞或其它細(xì)胞分泌的有生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)，通過(guò)與靶細(xì)胞受體結(jié)合后，激活細(xì)胞信號(hào)通路，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞生理功能，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，參與免疫應(yīng)答和組織修復(fù)等。因此，細(xì)胞因子在促進(jìn)牙齦組織炎癥，加速牙周結(jié)締組織的破壞和牙槽骨的吸收中具有重要作用。所以，尋找有效的、重要的牙周炎發(fā)生發(fā)展相關(guān)細(xì)胞因子是闡述牙周炎發(fā)病機(jī)理，研究早期診斷和治療靶點(diǎn)亟需解決的重要課題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供用于慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)的標(biāo)志物及試劑盒。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

用于慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)的標(biāo)志物，所述標(biāo)志物包括p19、p40、p35、EBI3中至少一種，所述標(biāo)志物包括標(biāo)志物的DNA、mRNA或編碼的蛋白質(zhì)。

優(yōu)選的，所述標(biāo)志物由p19mRNA、p35mRNA、EBI3mRNA和/或p40mRNA構(gòu)成。

優(yōu)選的，p19mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.9，p35mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.8，EBI3mRNA相對(duì)表達(dá)量≥2.0，和/或p40mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.9，則判定為慢性牙周炎陽(yáng)性。

優(yōu)選的，標(biāo)志物在離體的外周血、牙齦組織或齦溝液中檢測(cè)。

能夠定量檢測(cè)標(biāo)志物的試劑在制備慢性牙周炎篩查、診斷、療效評(píng)價(jià)試劑盒中的應(yīng)用，所述標(biāo)志物包括p19、p40、p35、EBI3中至少一種，所述標(biāo)志物包括標(biāo)志物的DNA、mRNA或編碼的蛋白質(zhì)。

優(yōu)選的，所述標(biāo)志物由p19mRNA、p35mRNA、EBI3mRNA和/或p40mRNA構(gòu)成。

進(jìn)一步優(yōu)選的，p19mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.9，p35mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.8，EBI3mRNA相對(duì)表達(dá)量≥2.0，和/或p40mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.9，則判定為慢性牙周炎陽(yáng)性。

優(yōu)選的，能夠定量檢測(cè)標(biāo)志物的試劑可選自引物、抗體或芯片。

進(jìn)一步優(yōu)選的，定量檢測(cè)標(biāo)志物的引物為：

定量檢測(cè)P19mRNA的引物對(duì)：

F：5’-CAGCGCCCCCTTCTCCGTTC-3’；

R：5’-CTCAGGCCACGCAGCTGCTT-3’；

定量檢測(cè)P40mRNA的引物對(duì)：