[發(fā)明專利]一種超靈敏高選擇性檢測(cè)次氯酸的探針

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810368295.6
• 申請(qǐng)日: 2018-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108409697A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柳彩云;吳柳;王雅偉;趙子揚(yáng);王作凱;賈盼;張萌;朱寶存
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D311/16
• 分類號(hào): C07D311/16;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京三高永信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11138
• 代理人: 邢惠童

本發(fā)明涉及一種超靈敏高選擇性檢測(cè)次氯酸的探針。具體地，本發(fā)明的探針為一類香豆素類化合物，其可作為次氯酸熒光探針用于次氯酸的檢測(cè)。這類探針可實(shí)現(xiàn)如下的技術(shù)效果中的至少一個(gè)：高靈敏高選擇性地識(shí)別次氯酸并進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)；可以快速對(duì)次氯酸實(shí)現(xiàn)響應(yīng)；可以實(shí)現(xiàn)對(duì)次氯酸的即時(shí)檢測(cè)；性質(zhì)穩(wěn)定，可以長(zhǎng)期保存使用；有利于在實(shí)際樣本中對(duì)(體內(nèi)/體外)次氯酸進(jìn)行檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及香豆素類化合物作為次氯酸熒光探針，其可在純水體系下對(duì)細(xì)胞內(nèi)源性次氯酸進(jìn)行快速超靈敏高選擇性檢測(cè)，或者其可測(cè)定實(shí)際水樣中次氯酸的濃度。

背景技術(shù)

在人體內(nèi)，次氯酸(HClO)可以以髓過(guò)氧化物酶(MPO)催化反應(yīng)的過(guò)氧化氫和氯離子的調(diào)節(jié)方式產(chǎn)生，其與先天宿主防御和對(duì)殺死各種病原體非常重要。在體外，由于泳池水次氯酸濃度過(guò)高導(dǎo)致的游泳池中毒事件現(xiàn)依舊頻頻發(fā)生。生物體內(nèi)產(chǎn)生或蓄積過(guò)量的次氯酸，會(huì)引起多種疾病，包括心血管疾病，動(dòng)脈粥樣硬化，骨關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和肺損傷，嚴(yán)重還會(huì)導(dǎo)致癌癥。因此，檢測(cè)實(shí)際水體和生物體系中次氯酸的濃度已成為一個(gè)重要的課題，現(xiàn)亟待發(fā)展快速、靈敏、高選擇性檢測(cè)次氯酸的手段。

當(dāng)前，常見(jiàn)的次氯酸檢測(cè)手段主要是碘還原滴定法、分光光度法、化學(xué)發(fā)光分析法、庫(kù)倫法等。但這些分析手段在實(shí)際應(yīng)用中既昂貴又繁瑣，且常常需要特殊的昂貴實(shí)驗(yàn)儀器和高技能專業(yè)操作人員。因此，高效、廉價(jià)、簡(jiǎn)捷的次氯酸檢測(cè)手段成為重要的研究課題。

在各種離子/分子的檢測(cè)方法中，熒光探針檢測(cè)法由于操作簡(jiǎn)單，可在現(xiàn)場(chǎng)使用，選擇性和靈敏度高，檢測(cè)范圍廣，響應(yīng)時(shí)間快速，能夠進(jìn)行原位檢測(cè)和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，檢測(cè)過(guò)程對(duì)樣品沒(méi)有破壞而極為引人注目。但是目前報(bào)道的熒光探針仍存在一些問(wèn)題，包括靈敏度低、選擇性差以及合成復(fù)雜等。總之，發(fā)展具有高靈敏度、高選擇性、合成步驟簡(jiǎn)單的次氯酸熒光探針是本領(lǐng)域技術(shù)人員急需解決的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本領(lǐng)域急需一種制備簡(jiǎn)單的快速高靈敏高選擇性識(shí)別次氯酸的熒光探針，從而能夠有效檢測(cè)體內(nèi)或體外次氯酸。為此，本發(fā)明合成了一類新穎的次氯酸的熒光探針，其合成簡(jiǎn)單、超靈敏、穩(wěn)定性高、和/或選擇性高，和/或能夠快速特異性識(shí)別次氯酸。

具體而言，本發(fā)明提供了一種次氯酸熒光探針，其為香豆素類化合物，其結(jié)構(gòu)如下：

優(yōu)選的，本發(fā)明的熒光探針是：

在本發(fā)明的次氯酸熒光探針的制備方法中，反應(yīng)條件是常溫?cái)嚢瑁环磻?yīng)時(shí)間是15-24h；和/或7-羥基香豆素與二甲氨基硫代甲酰氯的摩爾比為約1：4至1：12，優(yōu)選為1：10或1：12。

本發(fā)明還提供了用于檢測(cè)樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的檢測(cè)制劑或試劑盒，其包含本發(fā)明的探針。優(yōu)選地，本發(fā)明的檢測(cè)制劑或試劑盒還包含產(chǎn)品的使用說(shuō)明書。還優(yōu)選地，本發(fā)明的試劑盒還包含用于測(cè)定樣本中的次氯酸濃度的緩沖劑。

本發(fā)明還提供了檢測(cè)樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的方法，其包括將本發(fā)明的探針與待測(cè)樣本接觸的步驟。

本發(fā)明還提供了本發(fā)明的探針在制備用于檢測(cè)樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的制劑中的用途。

本發(fā)明還提供了本發(fā)明的探針在制備用于檢測(cè)樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的試劑盒中的用途。

本發(fā)明的次氯酸熒光探針可與次氯酸進(jìn)行特異性作用，產(chǎn)生熒光光譜的變化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)次氯酸的定量檢測(cè)。

具體而言，本發(fā)明的次氯酸熒光探針?lè)謩e與過(guò)氧化氫、過(guò)氧化亞硝酸鹽、氯酸鹽以及其他物質(zhì)進(jìn)行作用均不能導(dǎo)致熒光光譜的明顯改變，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)次氯酸的特異性識(shí)別。

可選擇地，本發(fā)明的次氯酸熒光探針的穩(wěn)定性好，進(jìn)而能夠長(zhǎng)期保存使用。