[發明專利]在側流筒中利用熒光測定法的維生素D的快速定量檢測方法

有效

• 申請號: 201810366783.3
• 申請日: 2018-04-23
• 公開（公告）號: CN108872168B
• 公開（公告）日: 2021-03-05
• 發明（設計）人: 崔義烈;朱厚暾;金禛洙
• 申請（專利權）人: 韓國巴迪泰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/38
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦

本發明涉及在側流筒中利用熒光測定法的維生素D的快速定量檢測方法，本發明的方法不需要以往的時間和勞動集約型的試樣預處理步驟，因此能夠快速且準確地測定維生素D。

技術領域

本發明涉及在側流筒中利用了熒光測定法的維生素D的快速定量檢測方法(Rapidquantitative fluorescent immunoassay method for vitamin D using lateral flowcartridge)。

背景技術

維生素D是一種脂溶性維生素，它通過調節鈣與磷的數值來幫助骨骼健康成長并維持骨骼的健康，而且還起到調節免疫系統和血糖并抑制各種感染發生的作用。如果維生素D不足，則骨質疏松癥、摔傷、髖部骨折的發生率不僅比較高，而且各種癌癥或自身免疫疾病的發病也增加。

維生素D(骨化醇，calciferol)分為D₂(麥角鈣化醇，ergocalciferol)和D₃(膽鈣化醇，cholecalciferol)。維生素D₂由酵母和作為植物甾醇(sterol)的麥角甾醇(ergosterol)制得，維生素D₃是對皮膚照射陽光紫外線時可以由作為膽固醇的前體的7-脫氫膽固醇(7-dehydrocholesterol)制得的，已知它們的有效性幾乎相同。

就維生素D而言，無論是在體內合成的維生素D還是從食品中攝取的維生素D均是作為活性激素的前體的激素原(pro-hormone)形態，需要在肝和腎臟中轉化為活化形態才能夠發揮生物功能。在肝中，維生素D₃和維生素D₂經過25號碳位置被氫氧化而分別代謝成25-羥基維生素D₃(25-OH-D₃)和25-羥基維生素D₂(25-OH-D₂)，上述25-羥基維生素D₃和25-羥基維生素D₂被運送至腎臟，再次1號碳位置被氫氧化，從而25-羥基維生素D₃被代謝成活性激素1,25-二羥基維生素D₃，25-羥基維生素D₂被代謝成活性激素1,25-二羥基維生素D₂。

對于掌握并監控維生素D的匱乏或過量，最適合的檢測是測定25-羥基維生素D，為了測定25-羥基維生素D的準確的量，需要對25-羥基維生素D₃(25-OH-D₃)和25-羥基維生素D₂(25-OH-D₂)均進行測定。

作為通常使用的維生素D的檢測方法，大致有LC-MS/MS(液相色譜-質譜/質譜(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry/Mass Spectrometry))方法和化學發光免疫測定法(chemiluminescence immunoassay，CLIA)。LC-MS/MS方法是維生素D的標準檢測方法，優點在于，準確性高且靈敏度和精確度高，而且還能夠將維生素D₃與D₂區分出來測定。但是，LC-MS/MS方法的缺點在于需要具備昂貴的分析設備。另外，CLIA法的優點在于，由于使用了自動化設備因此能夠實現快速測定，而且靈敏度和精確度高且還不需要預處理過程。但是，缺點在于，由于CLIA法根據試劑或方法的不同而差異比較大，各檢測機關的結果可能都不同。

另一方面，韓國公開專利第2015-0100935號中公開了“維生素D的測定方法以及測定用試劑盒”，特征在于用具有類固醇骨架的表面活性劑來處理樣品。另外，韓國公開專利第2015-0110680號中公開了“檢測1,25-二羥基維生素D及其相關抗體的方法以及試劑盒”，但是并未公開本發明的在側流筒中利用熒光測定法的維生素D的快速定量檢測方法。

發明內容