[發明專利]一種香柚微芽嫁接的方法

有效

• 申請號: 201810366498.1
• 申請日: 2018-04-23
• 公開（公告）號: CN108401906B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 張斌;袁志輝;何福林;劉小文;劉偉;劉春霖
• 申請（專利權）人: 湖南科技學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G2/30;A01G2/10;A01G31/00;A01G17/00
• 代理公司: 長沙和雅知識產權代理事務所(普通合伙) 43238
• 代理人: 丁偉

1.一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)外植體的選擇與消毒，在春季或者秋季取香柚塊莖在室內發芽，芽長大后定期噴灑殺菌劑，兩周后，再次取芽，芽經過35-40℃熱處理后放在5％的次氯酸鈉溶液處理8-10min，然后在超凈臺上的解剖鏡8-40倍下進行莖尖剝離，選取頂芽的莖尖作為備用；(2)初代培養，將選取的莖尖再次放入5％的次氯酸鈉溶液處理3-5min后，放入初代培養基中快速繁殖長大；所述初代培養基的組成為：MS培養基+0.1-0.5mg/L的NAA和/或0.1-0.5mg/L的BA，pH為5.6-6.0；(3)次代培養，將長大后的莖尖接種在次代培養基上培養，誘導分化為愈傷組織；所述次代培養基的組成為：MS培養基+0.1-0.5mg/L的NAA和/或0.1-0.5mg/L的BA+0.6-1.0mg/L的GA，pH為5.6-6.0；(4)基本培養，將愈傷組織接種在基本培養基上培養，發育成完整的試管苗；所述基本培養基的組成為：MS培養基+6-BA0.2-0.5mg/L+NAA 0.2-0.5mg/L+蔗糖28-32g/L+瓊脂6-8g/L，pH 5.6-7.0；(5)試管苗的脫毒檢測；(6)試管苗的嫁接，將步驟(4)培養的試管苗嫁接在砧木上，形成嫁接苗；(7)煉苗，對嫁接苗進行光、溫鍛煉；(8)移栽定植，采用單芽莖段或雙芽莖段扦插式移栽，邊剪取邊扦插，扦插基質可采用滅過菌的珍珠巖或疏松土壤；(9)看護培養，扦插成活后每隔2-3d噴1次營養液，后期每隔10d噴一次，以促進扦插苗健壯和順利成長；(10)無毒種苗，將扦插苗移植于田間，大規模種植。

2.根據權利要求1所述的一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的殺菌劑為0.1％多菌靈和0.1％鏈霉素的混合液。

3.根據權利要求1所述的一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，所述莖尖為頂芽的前端0.3-0.5mm的部分，所述莖尖帶有1-2個葉原基。

4.根據權利要求1所述的一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，所述初代培養的初期的光照強度為1000lx，4周后增加到2000lx，6周后增加到4000lx，培養溫度為21-25℃，光照時間為14-18h/d。

5.根據權利要求1所述的一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，所述初代培養基、次代培養基和所述基本培養基均是經過巴氏殺毒冷卻后再使用的。

6.根據權利要求1所述的一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，所述試管苗通過PCR病毒檢測方法確定是否含有香柚病毒的。

7.根據權利要求1所述的一種香柚微芽嫁接的方法，其特征在于，所述步驟(7)煉苗的具體做法是：移植前7d，將長有3～5片葉、高2～3cm的嫁接苗擺放在溫室內的馴化畦內，畦內澆上水，畦上方半遮陽進行馴化，以防止強光、高溫灼傷嫁接苗和維持嫁接苗周圍的溫度，煉苗期溫室內的溫度要求白天23～27℃，夜間不低于10℃。