[發(fā)明專利]利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810365031.5
• 申請(qǐng)日: 2018-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108531493A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹貴方;王鑫;智達(dá)夫;李喜和;劉默凝;李秀男;魏薇;田志鵬;龍?chǎng)?/a>;王大清;張福全
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/62
• 分類號(hào): C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 趙敬

1.一種利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：它包括以下步驟：

1）、以RT-PCR的方法獲得克隆了SUMO-sbd-1的成熟肽全基因序列；

2）、克隆入原核表達(dá)載體pet-22b中，構(gòu)建表達(dá)載體pet-22b- SUMO-sbd-1；

3）、轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)胞，提出SUMO-sbd-1蛋白；

4）、轉(zhuǎn)化到BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞構(gòu)建表達(dá)菌株；

5）、誘導(dǎo)表達(dá)、超聲破碎、蛋白純化、濃縮、抑菌實(shí)驗(yàn)，得到綿羊β-防御素sbd-1目的蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：所述SUMO-sbd-1成熟肽基因，其核苷酸序列為SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：編碼綿羊β-防御素sbd-1的基因。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：含有綿羊β-防御素sbd-1基因的重組質(zhì)粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：含有綿羊β-防御素sbd-1基因的重組質(zhì)粒，其為pet-22b-SUMO-sbd-1。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：含有綿羊β-防御素sbd-1基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：含有綿羊β-防御素sbd-1基因的重組載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞為大腸桿菌DH5α。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法，其特征在于：含有綿羊β-防御素sbd-1基因的重組載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞為大腸桿菌BL21(DE3)。

9.一種利用權(quán)利要求1所述利用小泛素相關(guān)修飾物SUMO體外表達(dá)綿羊β-防御素的方法獲得的綿羊β-防御素sbd-1在抗生素中的應(yīng)用。