[發(fā)明專利]一種苦丁茶老葉中綠原酸的提取工藝

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810363522.6
• 申請(qǐng)日: 2018-04-21
• 公開（公告）號(hào): CN108276286A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柳賢德;張偉浩;林冠妃;崔志剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南大學(xué)
• 主分類號(hào): C07C69/732
• 分類號(hào): C07C69/732;C07C67/48;C07C67/56;C07C67/52
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本發(fā)明涉及一種從苦丁茶老葉提取綠原酸的方法，對(duì)苦丁茶老葉粗粉進(jìn)行乙醇和乙酸乙酯的提取，得到綠色的結(jié)晶，提取物為綠原酸。本發(fā)明從苦丁茶老葉中提取綠原酸，并且提供提取綠原酸的工藝，其提取工藝簡(jiǎn)單，成本低，還能有效抑制人肝癌細(xì)胞HepG2和小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26的增值，可提高苦丁茶副產(chǎn)物的綜合利用率，具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥用植物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種大葉冬青苦丁茶老葉中綠原酸的提取工藝。

背景技術(shù)

由于綠原酸結(jié)構(gòu)復(fù)雜，人工合成困難，大都是從天然植物中提取分離得到，如金銀花、枇杷葉等都是綠原酸的主要原料。綠原酸的提取分離大都使用有機(jī)溶劑法和硅膠柱層析法。有機(jī)溶劑法具有過程繁瑣、含量低等特點(diǎn)；硅膠柱層析法在工業(yè)操作上會(huì)有一定的困難。

苦丁茶，是冬青科，冬青屬苦丁茶種常綠喬木，是我國(guó)一種傳統(tǒng)的純天然保健飲料佳品，具有清熱消暑、潤(rùn)喉止咳、抑癌防癌、抗衰老、活血絡(luò)等各種功效。苦丁茶中含有苦丁皂甙、氨基酸、維生素C、多酚類、黃酮類、咖啡堿等兩百多種成分。苦丁茶樹開始生長(zhǎng)后約25天內(nèi)，其幼芽嫩葉尚可作為制作嫩茶的原料，但其采摘時(shí)間短促、數(shù)量少、制作成本高。待到25天后幼葉迅速長(zhǎng)足，葉質(zhì)變硬，成為老葉，老葉采摘時(shí)間長(zhǎng)、數(shù)量多、資源豐富，但只能用其制作老葉茶。老葉茶與嫩茶相比，口感差、不耐沖泡，品質(zhì)相差甚遠(yuǎn)。因此，老葉作為苦丁茶副產(chǎn)物，經(jīng)常當(dāng)成垃圾扔掉，造成資源的浪費(fèi)。

大葉冬青苦丁茶老葉資源豐富，其中綠原酸的含量為1%以上，是目前發(fā)現(xiàn)的為數(shù)不多的綠原酸含量在1%以上的天然植物，是一種不可多得的用于提取綠原酸的優(yōu)質(zhì)原料。目前尚未見有從大葉冬青苦丁茶老葉中提取綠原酸的相關(guān)報(bào)道。因此，研究和建立從苦丁茶老葉中提取綠原酸的方法有助于深入開發(fā)利用苦丁茶資源和降低綠原酸的生產(chǎn)成本。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種以大葉冬青苦丁茶老葉的提取工藝，該方法提取工藝簡(jiǎn)單，可較好地降低成本，提高提取效率。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種苦丁茶老葉中綠原酸的提取工藝，包括以下步驟：

（1）采摘足量的苦丁茶老葉，45℃烘干，干燥后粉碎成末；

（2）將茶粉與無水乙醇以固液比1:15進(jìn)行提取，可使用回流提取或者超聲提取；

（3）初提完的乙醇溶液通過離心除去殘?jiān)瑢⒊堅(jiān)囊掖继崛∫簻p壓濃縮，濃縮液用硫酸調(diào)到pH=4左右，加水充分沉淀，過濾，烘干沉淀物；

（4）對(duì)濃縮液進(jìn)一步濃縮成膏狀，向膏狀物中加入4倍體積乙酸乙酯，洗滌三次；

（5）將膏狀物進(jìn)行冷凍干燥，得到無水苦丁茶綠原酸提取物粉末。

優(yōu)選的，所述的步驟（2）中苦丁茶老葉茶粉與無水乙醇固液比為1:15；回流提取時(shí)間為12h，提取溫度為85℃，或者超聲提取時(shí)間為12h，提取溫度為50℃。

優(yōu)選的，所述的步驟（3）中離心可選擇相對(duì)離心力為10000Xg，運(yùn)動(dòng)時(shí)間為15min，或者相對(duì)離心力為8000Xg，運(yùn)動(dòng)時(shí)間為30min；沉淀選擇靜置20小時(shí)。

優(yōu)選的，所述的步驟（4）中加入浸膏體積4倍的乙酸乙酯洗滌。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：選擇資源豐富且目前處于廢棄不用狀態(tài)的大葉冬青苦丁茶老葉作為原料；所用的試劑對(duì)環(huán)境污染小，過程中主要使用乙醇溶液，少量使用乙酸乙酯液去除去脂類物質(zhì)；經(jīng)過多次回流提取或超聲提取可將苦丁茶老葉中的有效成分提取更為完全；通過高速離心的方法能減少提取液中的雜質(zhì)，使得純度高，提高產(chǎn)品品質(zhì)；減壓濃縮的乙醇得以回收可重復(fù)利用，可減少乙醇溶劑的浪費(fèi)，降低成本。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜(HPLC)圖譜。