[發明專利]一種顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法

在審

• 申請號: 201810360321.0
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108504697A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發明（設計）人: 葛橋;胡傳炯;薛兵;張東武
• 申請（專利權）人: 安徽天邦生物技術有限公司
• 主分類號: C12P7/52
• 分類號: C12P7/52;C12N1/20;C12R1/145
• 代理公司: 合肥順超知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 34120
• 代理人: 黃晶晶

1.一種顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法，其特征在于，提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法包括以下步驟：

S1、將丁酸梭菌接種到培養基中，培養至培養液的pH小于3.5，在丁酸梭菌芽孢形成前期每隔6-8h，在80-85℃水浴條件下進行耐受處理，收集耐受處理后的菌液，分離耐受菌株；

S2、將步驟S1中的耐受菌株接種至液體搖瓶培養基中培養至對數期后得到一級種子；

S3、取步驟S2中的一級種子菌種總量的1％接種至50L的種子罐中的一級培養基中，培養至對數生長期后得到二級種子；

S4、取步驟S3中的二級種子菌種總量的1.5％接種至1800L的發酵罐中二級培養基中培養至對數期，檢測培養液pH至5.5時，往發酵罐中滴加質量分數為12％碳酸鈉溶液，繼續培養至芽孢后期。

2.根據權利要求1所述的顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法，其特征在于，所述步驟S1中將丁酸梭菌接種到培養基中，培養至培養液的pH小于3.5，在丁酸梭菌芽孢形成前期每隔7h，在82℃水浴條件下進行耐受處理，收集耐受處理后的菌液，分離耐受菌株。

3.根據權利要求1所述的顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法，其特征在于，所述步驟S3中的一級培養基由以下重量組分配比的的原料制成：酵母膏0.3％，牛肉膏1％，蛋白胨1％，可溶性淀粉0.1％，葡萄糖0.5％，氯化鈉0.5％，半胱氨酸鹽酸鹽0.05％，乙酸鈉0.3％，余量為水。

4.根據權利要求1所述的顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法，其特征在于，所述步驟S3中碳酸鈉溶液滴加總量為發酵液總量的1.3％。

5.根據權利要求1所述的顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法，其特征在于，所述步驟S3中的二級培養基由以下重量組分配比的的原料制成：葡萄糖2％，淀粉0.35％，玉米粉0.37％，豆粕粉4.5％，硫酸銨0.1％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.2％，小蘇打0.124％，磷酸二氫鉀0.2％，碳酸鈣0.2％，硫酸鎂0.07％，硫酸錳0.02％，硫化鈣0.6％，消泡劑0.15％，余量為水。

6.根據權利要求1-5任一所述的顯著提高丁酸產量的丁酸梭菌發酵方法，其特征在于，控制所述步驟S1-S4全程培養時間為72-78h，培養溫度為37℃。