[發明專利]用于檢測白色念珠菌的試劑盒及方法

在審

• 申請號: 201810360158.8
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108588169A
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 陳耀;余一海;譚有將;戴盡波;陳靜;梁惠堯;雷志斌
• 申請（專利權）人: 廣東順德工業設計研究院（廣東順德創新設計研究院）
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12R1/725
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 向薇

本發明公開一種用于檢測白色念珠菌的試劑盒和方法，其中，用于檢測白色念珠菌的試劑盒包括液體培養基和微滴生成油，所述液體培養基包含胰蛋白胨4g/L～6g/L、肉胃蛋白酶消化物4g/L～8g/L、葡萄糖15g/L～30g/L和抗生素0.2g/L～0.5g/L。用于檢測白色念珠菌的方法，包括以下步驟：將待檢測樣本接種至所述液體培養基中，然后采用微滴生成油將接種有所述待檢測樣本的所述液體培養基制成微滴；將所述微滴培養18～72小時，再進行顯微觀察。該方法成本較低，可以較快速和準確的檢測出待檢測樣本中的白色念珠菌。

技術領域

本發明涉及微生物檢測技術領域，具體涉及一種用于檢測白色念珠菌的試劑盒和方法。

背景技術

白色念珠菌(CanidiaAlbicans，CA)又稱白假絲酵母菌，是人體正常菌群，主要寄生在人體的體表及口腔、消化道、呼吸道和女性生殖道等部位，通常不會引起疾病，但在免疫系統受到損害或抑制的情況下，可引起嚴重的白色念珠菌病，甚至危及生命。據我國醫院感染監測網分析，醫院真菌感染發生率從20世紀90年代初的13.9％上升至90年代末的24.4％，而白色念珠菌的感染占真菌感染的約60％，病死率約占20％～63％，白色念珠菌已成為臨床感染的常見致病菌。因此提供一種能夠提高白色念珠菌有無的檢測精確度的檢測方法成為亟待解決的問題。

雖然最新的聚合酶鏈式反應(PCR)檢測技術具有較好的準確性，但是由于PCR檢測需要對儀器和設備有較高的要求，因此成本過高，不利于普及。目前臨床上對白色念珠菌的檢測依然以傳統方法為主，即采取分離培養、鏡檢觀察、生化鑒定等多個步驟，檢測周期長，通常需要4～7天，時間過長。

發明內容

基于此，有必要提供一種成本低、檢測速度快且能夠提高白色念珠菌有無的檢測精確度的用于檢測白色念珠菌的試劑盒和方法。

一種用于檢測白色念珠菌的試劑盒，包括液體培養基及微滴生成油，所述液體培養基包含胰蛋白胨4g/L～6g/L、肉胃蛋白酶消化物4g/L～8g/L、葡萄糖15g/L～30g/L及抗生素0.2g/L～0.5g/L。

在其中一個實施例中，所述液體培養基中胰蛋白胨的含量為5g/L、肉胃蛋白酶消化物的含量為5g/L、葡萄糖的含量為20g/L。

在其中一個實施例中，所述抗生素選自青霉素、鏈霉素和氯霉素中的至少一種。

在其中一個實施例中，所述抗生素為青霉素、鏈霉素和氯霉素的組合，所述青霉素的含量為0.08g/L～0.12g/L，鏈霉素的含量為0.08g/L～0.12g/L，所述氯霉素的含量為0.15g/L～0.25g/L。

在其中一個實施例中，所述液體培養基的pH值為5～6。

上述試劑盒非常適合白色念珠菌的微滴培養、可以縮短培養時間，從而可以加速白色念珠菌的檢測進程。

本發明的另一目的在于提供一種將上述試劑盒用于檢測白色念珠菌的方法，包括以下步驟：

將待檢測樣本接種至所述液體培養基中，然后采用所述微滴生成油將接種有所述待檢測樣本的所述液體培養基制成微滴；

將所述微滴培養18～72小時，再進行顯微觀察。

在其中一個實施例中，所述微滴的培養溫度為35℃～37℃。

在其中一個實施例中，所述微滴的培養時間為42～72小時。

在其中一個實施例中，在所述顯微觀察之前還包括將培養之后的微滴進行破乳并稀釋的步驟。

在一個實施例中，當所述待檢測樣本為液體時，在所述將待檢測樣本接種至液體培養基中的步驟之前還包括所述待檢測樣本的預處理步驟，具體為將所述待檢測樣本于1000rpm/min條件下離心3min～5min后取上清液。