[發(fā)明專利]N-氨甲酰谷氨酸在豬卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810359826.5
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108342352B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馮濤;劉彥;白佳樺;許曉玲;宋玉清;肖霖力;肖銀霞
• 申請（專利權(quán)）人: 北京市農(nóng)林科學院
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 北京智為時代知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11498
• 代理人: 王加嶺;楊靜

本發(fā)明提供了N?氨甲酰谷氨酸的一種用途，具體地，N?氨甲酰谷氨酸用于在制備豬卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)劑中的應(yīng)用，可用于促進豬卵泡顆粒細胞體外增殖，并抑制孕酮和雌二醇的分泌。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及家畜養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及N-氨甲酰谷氨酸在豬卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

顆粒細胞是卵巢中最大的細胞群，具有強大的分泌功能，卵母細胞可以通過與其之間的間隙連接獲取所需的營養(yǎng)物質(zhì)，從而發(fā)育至成熟。顆粒細胞作為卵泡的功能細胞，其分泌的類固醇激素參與了卵泡生長啟動、增殖、分化、閉鎖、排卵到黃體生成整個過程，期間顆粒細胞的數(shù)量、形態(tài)和功能也發(fā)生相應(yīng)的變化。顆粒細胞增殖和凋亡不僅受下丘腦-垂體-卵巢軸系的控制，也受到卵巢自身自分泌和旁分泌因子的調(diào)控。近期研究表明，一些營養(yǎng)因子如綠茶提取物也能調(diào)控顆粒細胞的增殖和類固醇激素的分泌功能。顆粒細胞增殖和分化是其行使功能的主要途徑，增殖主要表現(xiàn)為細胞數(shù)量的增多，而分化則表現(xiàn)為類固醇激素分泌活性的變化。

N-氨甲酰谷氨酸（N-carbamylglutamate，NCG）是N-乙酰谷氨酸的結(jié)構(gòu)類似物，是精氨酸（Arginine，ARG）合成的限速酶，日糧中添加N-氨甲酰谷氨酸能夠促進精氨酸的內(nèi)源性合成。精氨酸是仔豬生長的限制性氨基酸，日糧中添加精氨酸能對仔豬生長發(fā)育和健康狀態(tài)發(fā)揮多種調(diào)控作用。Chevez等研究表明在Suffolk綿羊日糧中添加精氨酸可提高繁殖力，但并未提高排卵率。近期研究表明，妊娠母豬日糧中添加N-氨甲酰谷氨酸能夠促進血漿中精氨酸濃度、促進血管生成。在高產(chǎn)奶牛上，N-氨基葡萄糖添加能提高蛋白利用率，增加泌乳性能并降低奶、血漿和尿中氨氮的含量，并對繁殖性能產(chǎn)生潛在的影響，但具體如何影響并不清楚。

N-氨甲酰谷氨酸和精氨酸影響卵巢顆粒細胞增殖的影響研究較少。在人上，精氨酸被認為是一個子宮內(nèi)膜細胞生長因子，主要是通過抑制上皮細胞凋亡發(fā)揮作用。D-天冬氨酸在體外能刺激蜥蜴卵泡上皮細胞增殖。迄今為止，沒有有關(guān)N-氨甲酰谷氨酸對豬大卵泡顆粒細胞增殖影響的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供N-氨甲酰谷氨酸的一種用途，用于在制備豬卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)劑中的應(yīng)用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下的技術(shù)方案為：

N-氨甲酰谷氨酸用于在制備豬卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)劑中的應(yīng)用。

如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述N-氨甲酰谷氨酸用于制備促進豬卵泡顆粒細胞體外增殖的促進劑。

如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述N-氨甲酰谷氨酸與IGF-1和/或FSH用于制備促進豬卵泡顆粒細胞體外增殖并抑制孕酮和雌二醇分泌的試劑或藥品。

如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述N-氨甲酰谷氨酸在體外培養(yǎng)劑中的用量為19μg/ml-190μg/ml。

如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述體外培養(yǎng)劑為含有類胰島素一號增長因子的DMEM培養(yǎng)基。

如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述DMEM培養(yǎng)基還包括卵泡刺激素。

如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述DMEM培養(yǎng)基為含5%的PS、5%的FBS、0.12mmol/L的慶大霉素和38.5mmol/L的碳酸氫鈉。

本發(fā)明還提供一種細胞體外培養(yǎng)劑，所述體外培養(yǎng)劑中含有N-氨甲酰谷氨酸。

如上所述的體外培養(yǎng)基，優(yōu)選地，所述體外培養(yǎng)劑為含有19μg/ml-190μg/ml所述N-氨甲酰谷氨酸的DMEM培養(yǎng)基。

如上所述的體外培養(yǎng)基，優(yōu)選地，所述體外培養(yǎng)劑中還含有PS、FBS、慶大霉素和碳酸氫鈉。

本發(fā)明的有益效果在于：