[發(fā)明專利]用于刑偵目的生物體液中咪唑啉類藥物的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810359783.0
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108956795B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 任昕昕;崔冠峰;王愛華;王瑞花;宋歌;張云峰;常靖;黃健;董林沛;于忠山;王芳琳;董穎;侯小平;魏春明;欒玉靜;杜鴻雁;張蕾萍
• 申請（專利權(quán)）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京冠榆知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11666
• 代理人: 朱亞琦;魏振柯

1.用于刑偵目的生物體液中咪唑啉類藥物的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)生物體液預(yù)處理；生物體液為全血或尿液；咪唑啉類藥物為四氫唑啉、賽洛唑啉、萘甲唑啉、安他唑啉和羥甲唑啉；

生物體液預(yù)處理采用如下方法之一：液-液萃取法或HLB柱固相萃取方法；

所述液-液萃取法包括如下步驟：取生物體液1mL，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH＝10，5mL丙酮振蕩提取，離心10min、轉(zhuǎn)速為8000r/min，轉(zhuǎn)移有機(jī)相至尖底玻璃試管中，再用5mL丙酮重復(fù)提取一次，合并有機(jī)相，50℃空氣流下?lián)]干，殘渣用200μL甲醇溶解定容，過0.22μm的有機(jī)系微孔濾膜，濾液即為液-液萃取法預(yù)處理液，留待LC-MS/MS檢測；

所述HLB柱固相萃取方法包括如下步驟：取生物體液1mL，加入1mL pH＝6的磷酸鹽緩沖液，混旋1分鐘，離心10min、轉(zhuǎn)速8000r/min，后取上清液待過柱；柱活化：取HLB固相萃取柱，依次以2mL甲醇、2mL水活化；過柱：上清液過柱，流速1.0mL/min；淋洗：2mL甲醇-水淋洗，甲醇與水的體積比為5:95；洗脫：用1mL甲醇洗脫，收集洗脫液；揮干定容：50℃空氣吹干儀上吹干，殘留物用200μL甲醇溶解，過0.22μm的有機(jī)系微孔濾膜，所得物即為HLB柱固相萃取方法預(yù)處理液，留待LC-MS/MS檢測；

(2)咪唑啉類藥物的檢測，使用液相色譜質(zhì)譜LC-MS/MS檢測咪唑啉類藥物；質(zhì)譜為ABSciex Qtrap 5500；

步驟(2)中，利用液相色譜質(zhì)譜LC-MS/MS檢測咪唑啉類藥物時的液相色譜條件及質(zhì)譜條件如下：

a)色譜柱：Aglient Zorbax Eclipse Plus C18或等效柱，規(guī)格：2.1mm×100mm，1.8μm；

b)流動相：A相：甲醇，B相：0.1％甲酸水溶液；0.1％甲酸水溶液是指100mL水中加入0.1mL甲酸配制而成；

c)洗脫：梯度洗脫，梯度洗脫條件如下：

時間/min	流速/mL/min	A相/V％	B相/V％
0.2	0.4	30	70
3	0.4	70	30
3.8	0.4	70	30
4.0	0.4	30	70
5.5	0.4	30	70

d)柱溫：35℃；

e)流速：0.4mL/min；

f)離子源：電噴霧電離源(ESI)；

g)檢測方式：正離子；

h)掃描方式：多反應(yīng)離子監(jiān)測(MRM)；

i)霧化氣、脫溶劑氣：氮氣；

j)碰撞氣：氬氣；

k)離子源溫度：150℃；

l)霧化溫度：500℃

m)毛細(xì)管電壓：5.5kV；

n)定性、定量離子、去簇電壓和碰撞能量條件如下：