[發明專利]一種酒石酸/磷酸泰樂菌素的制備方法

有效

• 申請號: 201810356481.8
• 申請日: 2018-04-19
• 公開（公告）號: CN108329370B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 成祥興;范澤雷;居亞東;劉萍
• 申請（專利權）人: 齊魯制藥（內蒙古）有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 張宏松

本發明涉及一種酒石酸/磷酸泰樂菌素的制備方法，本發明過濾后的發酵液通過特定的堿液、特定pH可以將發酵液中沒有過濾掉的特殊蛋白質進行析出分離，通過離心將發酵液中沒有過濾掉的特殊蛋白質及發酵產生的脂肪酸、部分油脂徹底去除，并且對溶媒乙酸丁酯起到凈化作用，促使萃取高效進行，在凈化溶媒的同時不會對溶媒造成其他任何影響，保證萃取順利進行，同時操作簡單、成本低，簡單、成本低的處理手段即可達到高效、徹底的減少發酵濾液雜質，提高了產品的純度及溶解性。

技術領域

本發明涉及一種酒石酸/磷酸泰樂菌素的制備方法，屬于生物農藥制備技術領域。

背景技術

泰樂菌素首先由美國學者Hamill等從泰國土壤中分離而得，產生菌有弗氏鏈霉菌(S.fradiae，NRR2702，2703)，龜裂鏈霉菌(S.rimosns)和吸水鏈霉菌(S.hygro-scopicus)；泰樂菌素有效成分包括：泰樂菌素A(真泰樂菌素)、泰樂菌素B(脫碳酶糖泰樂菌素Desmycosin)泰樂菌素C(大菌素mucrosin)和泰樂菌素D(雷洛霉素Relomysin)，A組分≥80％，總組分A+B+C+D≥95％，效價＞800IU。泰樂菌素各有效成分的化學結構式見下表1：

表1

泰樂菌素的發酵以豆油為主要碳源。葡萄糖對泰樂菌素的生物合成有明顯抑制作用，若分化期發酵中存在過量的葡萄糖，則促進ATP水平的上升，從而抑制泰樂菌素的生長，而豆油中的油酸、亞油酸經過甲基化形成甲基油酸，它是泰樂菌素的前體物質，能促進其生物合成。因此，在發酵過程中主要以補加豆油來滿足產生菌對碳源的需要。而嚴格控制豆油的加量是決定發酵成敗的關鍵。豆油含量低，不利于菌絲生長，而含量過高，則不能完全利用，產生脂肪酸積累，造成pH值下降，由此抑制了大菌素C甲基轉移酶的活性，影響了組份含量。泰樂菌素發酵過程中溫度、PH、菌絲生產狀況和豆油添加量，對大菌素C甲基轉移酶的活性具特征性指標意義，一直是決定泰樂菌素產量的關鍵點。

泰樂菌素的發酵應嚴格控制雜菌污染，若因條件有限或不可避免或因操作、設備等原因造成染菌，泰樂菌素發酵液染菌后，放罐質量差，有異臭，濾速慢，濾液渾濁，效價降低，殘油多，給提煉生產帶來很大困難，將直接影響泰樂菌素成品的收率和質量。若發酵液染菌嚴重，致使其無法處理而被迫倒罐，造成浪費和損失。發酵液變質的原因是由于雜菌的侵入，使泰樂菌素產生菌的生長繁殖發生異常。雜菌生長占了優勢，它的代謝產物，如各種酶及毒素就會大大抑制泰樂菌素產生菌的正常生長，促使泰樂菌素菌絲體自溶。培養基中就有大量的膠體蛋白存在，發酵液變得渾濁，濾速減慢而難予處理。

泰樂菌素各組分除了具有共同的16元環太內酯外，在其側鏈的碳霉氨糖上都有一個亞氨基，故其顯弱堿性。堿性條件下，以泰樂菌素堿的形式存在，易溶于有機溶媒；而在酸性條件下與酸結合成鹽的形式，易溶于水。根據這一特性，目前泰樂菌素的提取工藝一般采用溶媒萃取法。具體來講，發酵液經固液分離得到濾液，堿化至pH值9～10后用溶媒萃取到有機相，然后用磷酸或酒石酸反萃取到水相，最后經Ca(OH)₂中和除去過量的酸，活性炭脫色，空氣脫溶，再經納濾和噴霧干燥后得到磷酸泰樂菌素或酒石酸泰樂菌素。

上述提取工藝中，過濾后萃取，過濾后的濾液萃取過程中，會有部分未經過濾除去的蛋白質進入有機相中，同時發酵產生的部分脂肪酸也將進入酯相中，導致雜質并不能被有效分離。

因此，有效去除泰樂菌素發酵液中雜質，提高泰樂菌素的質量成為擺在眾多制藥企業面前亟待解決的突出問題。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供一種酒石酸/磷酸泰樂菌素的制備方法，本發明的方法徹底除去了過濾后的濾液蛋白質、殘油等雜質，為萃取做充分的準備，提高了泰樂菌素產品的純度及溶解度，且該制備方法工藝簡單，成本低，工序短，易于推廣利用。

本發明的技術方案如下：

一種酒石酸/磷酸泰樂菌素的制備方法，包括步驟如下：