[發明專利]與德高CR117大白菜抗根腫病性狀緊密連鎖的SSR分子標記、試劑盒及其應用有效
| 申請號： | 201810355108.0 | 申請日： | 2018-04-19 |
| 公開（公告）號： | CN108285930B | 公開（公告）日： | 2020-07-31 |
| 發明（設計）人： | 楊曉云;張清霞;張淑霞;司朝光;宋瑩;苗在京;孫吉祿;展恩軍;焦功強 | 申請（專利權）人： | 青島市農業科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 266000 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | cr117 大白菜 根腫病 性狀 緊密 連鎖 ssr 分子 標記 試劑盒 及其 應用 | ||
1.與德高CR117大白菜抗根腫病性狀緊密連鎖的SSR分子標記，其特征在于，所述SSR分子標記的核苷酸序列為序列表中SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.一種用于擴增權利要求1所述的SSR分子標記的引物對，包括正向引物和反向引物，其特征在于，所述正向引物的核苷酸序列為序列表中SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；所述反向引物的核苷酸序列為序列表中SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
3.一種用于鑒定德高CR117大白菜抗根腫病性狀緊密連鎖的SSR分子標記的試劑盒，其特征在于，包括權利要求2所述的引物對。
4.權利要求1所述的SSR分子標記、權利要求2所述的引物對或權利要求3所述的試劑盒在篩選具有抗根腫病性狀的德高CR117大白菜中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述篩選的方法，包括以下步驟：
(1)用權利要求2所述的引物對對待篩選德高CR117大白菜樣本進行PCR擴增，得到的PCR產物；
(2)將所述PCR產物進行SDS-PAGE凝膠電泳，僅產生111bp的電泳條帶的樣本判斷為具有抗德高CR117大白菜根腫病性狀的材料，僅產生123bp電泳條帶的樣本判斷為易感根腫病性狀的德高CR117大白菜材料。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述步驟(1)中PCR擴增的反應程序為：94℃預變性5min，94℃預變性45s，54℃退火30s，72℃延伸45s，35個循環，72℃延伸10min。
7.根據權利要求5或6所述的應用，其特征在于，所述步驟(1)中PCR擴增的反應體系如下：
8.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述步驟(2)中SDS-PAGE凝膠的濃度為6％～8％。
9.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述具有抗根腫病性狀的德高CR117大白菜還包括自交株。
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