[發明專利]一種絲膠蛋白和γ-聚谷氨酸自組裝體納米膠束的制備方法及用途

有效

• 申請號: 201810353345.3
• 申請日: 2018-04-19
• 公開（公告）號: CN108478527B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 蘇小舟;栗蕾;陳勁松
• 申請（專利權）人: 中原工學院
• 主分類號: A61K9/107
• 分類號: A61K9/107;A61K47/34;A61K47/42;A61K31/12;A61K31/015;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 孫詩雨;李宣宣

本發明公開了一種絲膠蛋白和γ?聚谷氨酸自組裝體納米膠束的制備方法，解決的技術問題是目前還沒有絲膠蛋白與其他蛋白或者聚合物之間進行自組裝的研究，本發明包括以下步驟：1）：選擇分子量在12000?24000Da的絲膠蛋白和分子量為10?120ku的γ?聚谷氨酸；2）制備相同質量濃度的絲膠蛋白溶液與γ?聚谷氨酸溶液：分別將絲膠蛋白和γ?聚谷氨酸溶解在去離子水中，配制成質量濃度相同且范圍為0.3?2%的溶液；3）制備絲膠蛋白和γ?聚谷氨酸自組裝體。本發明利用γ?聚谷氨酸與絲膠蛋白，首次通過靜電組裝的方法制備出γ?聚谷氨酸和絲膠蛋白納米自組裝體，可以應用抗癌藥物及疏水性藥物的包埋。

技術領域

本發明涉及藥物載體的研究與制備領域，具體涉及一種制備原料為較高分子量的絲膠蛋白與γ-聚谷氨酸的一種絲膠蛋白和γ-聚谷氨酸自組裝體納米藥物緩釋膠束的制備方法及用途。

背景技術

絲膠蛋白是包裹在絲素纖維表層的一種天然大分子蛋白，是構成蠶絲的主要蛋白，在紡織業絲膠蛋白被當作一種副產品而被丟棄，每年約有50000噸的絲膠蛋白被當作廢棄物處理，浪費了大量的天然蛋白資源。絲膠蛋白具有良好的生物活性，抗腫瘤活性及細胞粘附性，為其在生物醫藥及保健品領域的應用奠定了基礎，已經有人將絲膠蛋白與丙烯酸(AA)通過聚合反應制備出一種新穎的粘膜粘附性高聚物，但是這種聚合方法是有毒的操作過程。目前只有有關絲膠蛋白自身在溶液中組裝研究的報導，還沒有任何絲膠蛋白與其他蛋白或者聚合物之間進行自組裝的研究報導。

聚谷氨酸（γ-PGA）是一種非常理想的藥物載體，具有優良的生物相容性、可降解性、成纖維性及成膜性，也是一種非常優良的靶向藥物載體。是一種對人體和環境無害的天然高分子材料。目前已經有研究將γ-聚谷氨酸與乙二醇、N-三甲基殼聚糖及膽甾醇等高分子物質通過組裝制備藥物載體的報導，但還沒有將其與蛋白質進行組裝制備可控納米膠束的報導。

發明內容

本發明要解決的技術問題是絲膠蛋白與丙烯酸(AA)的聚合反應有毒的操作過程，目前還沒有任何絲膠蛋白與其他蛋白或者聚合物之間進行自組裝的研究，提供一種無毒無污染的絲膠蛋白和γ-聚谷氨酸自組裝體納米膠束的制備方法及用途。

為解決上述技術問題，本發明采用下述技術方案：一種絲膠蛋白和γ-聚谷氨酸自組裝體納米膠束的制備方法，包括以下步驟：1）：選擇分子量在12000-24000Da的絲膠蛋白和分子量為10-120ku的γ-聚谷氨酸；2）制備相同質量濃度的絲膠蛋白溶液與γ-聚谷氨酸溶液：分別將分子量在12000-24000Da的絲膠蛋白和分子量為10-120ku的γ-聚谷氨酸溶解在去離子水中，配制成質量濃度相同且范圍為0.3-2%的溶液；3）制備絲膠蛋白和γ-聚谷氨酸自組裝體。

1）絲膠蛋白與γ-聚谷氨酸的選擇和準備

要想通過自組裝制備納米膠束，在絲膠蛋白的選擇上就要既保證蛋白分子有足夠的生物活性，又要保證其具有相對的水溶性，否則無法制備水溶性的納米自組裝體，從而會導致其應用受到限制。絲膠蛋白因為其提取方法的不同而導致了其分子量從幾萬到30多萬不等，易溶性絲膠蛋白的分子量12000-24000Da之間，而普通絲膠蛋白分子量在50000-98000Da之間，易溶性絲膠蛋白粉在低溫及高溫的溶解度比普通絲膠蛋白分子量高的多，這樣就為其利用創造了非常有利的條件，可用于制備各種類型的醫用生物材料。本發明所制備及使用的納米膠束是在液體環境中使用的，因此本發明選擇分子量在12000-24000Da的絲膠蛋白作為制備自組裝納米膠束的原料之一，本發明分子量范圍的絲膠蛋白和γ-聚谷氨酸可以直接購買。

γ-聚谷氨酸的分子量一般在10-2000ku之間，為了組裝制備納米膠束得到熱動力穩定的自組裝體系，本發明使用分子量較小的γ-聚谷氨酸，其分子量選擇為10-120ku的γ-聚谷氨酸。

2）制備相同質量濃度的絲膠蛋白溶液與γ-聚谷氨酸溶液