[發(fā)明專利]一種可應(yīng)用于電化學(xué)手性識(shí)別的谷胱甘肽修飾電極的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810346999.3
• 申請(qǐng)日: 2018-04-18
• 公開（公告）號(hào): CN108645900A
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孔泳;葉秋敏;譚文勝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 常州大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N27/30
• 分類號(hào): G01N27/30;G01N27/327;G01N27/48
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本發(fā)明涉及一種可應(yīng)用于電化學(xué)手性識(shí)別的谷胱甘肽修飾電極的制備方法。包括以下步驟：制備谷胱甘肽溶液、制備谷胱甘肽修飾電極、電化學(xué)法識(shí)別氨基酸對(duì)映體。本發(fā)明的有益效果是：谷胱甘肽修飾電極的制備方法簡(jiǎn)單環(huán)保；且由于谷胱甘肽具有一定的手性環(huán)境，谷胱甘肽修飾電極對(duì)氨基酸對(duì)映體有著較好的識(shí)別能力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種可應(yīng)用于電化學(xué)手性識(shí)別的谷胱甘肽修飾電極的制備方法，屬于生物技術(shù)以及電化學(xué)領(lǐng)域。

技術(shù)背景

氨基酸的手性識(shí)別對(duì)藥物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、食品分析以及材料化學(xué)等領(lǐng)域都具有極其重要的研究?jī)r(jià)值。手性識(shí)別是指手性選擇劑特定地與某一構(gòu)型的手性異構(gòu)體結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)手性異構(gòu)體進(jìn)行區(qū)分。由于手性選擇劑的不同，對(duì)異構(gòu)體的識(shí)別效果也截然不同，所以對(duì)手性選擇劑的選取就顯得尤為重要。近來(lái)，我們團(tuán)隊(duì)已經(jīng)報(bào)道了基于苯丙氨酸二肽手性界面對(duì)氨基酸對(duì)映體進(jìn)行電化學(xué)手性識(shí)別的工作。然而，就我們所知，使用簡(jiǎn)單的生物單元如氨基酸，肽和蛋白質(zhì)進(jìn)行電化學(xué)手性識(shí)別的研究進(jìn)展甚微。

具有生物活性的多肽類藥物谷胱甘肽，其含有巰基、氨基、羧基、酰胺基等多種基團(tuán)，易于形成多種非共價(jià)鍵。對(duì)谷胱甘肽的檢測(cè)已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，但是將谷胱甘肽作為手性選擇劑應(yīng)用于電化學(xué)識(shí)別氨基酸尚未有報(bào)道，因此這種新型手性識(shí)別體系的開發(fā)有著重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種可應(yīng)用于電化學(xué)手性識(shí)別的谷胱甘肽修飾電極的制備方法。將谷胱甘肽修飾到玻碳電極表面后能夠有效的識(shí)別氨基酸對(duì)映體。

一種可應(yīng)用于電化學(xué)手性識(shí)別的谷胱甘肽修飾電極的制備方法，包括以下步驟：

a、制備谷胱甘肽溶液：稱取一定量的谷胱甘肽加入5mL的離心管中，用移液管移取4mL超純水溶解，待產(chǎn)物充分溶解后，即可獲得到一定濃度的谷胱甘肽溶液；

b、制備谷胱甘肽修飾電極：用移液槍移取步驟a制備得到的谷胱甘肽溶液滴加至玻碳電極表面，在一定溫度下孵育一定時(shí)間，即可獲得相應(yīng)的谷胱甘肽修飾電極；

c、電化學(xué)法識(shí)別氨基酸對(duì)映體：采用差分脈沖伏安法來(lái)識(shí)別氨基酸對(duì)映體，將谷胱甘肽修飾電極靜置于20～30mL氨基酸對(duì)映體溶液中一定時(shí)間，在0.4～1.2V的電化學(xué)窗口范圍內(nèi)記錄差分脈沖伏安圖，每次測(cè)完后，修飾電極在20～30mL 0.1～0.3M pH為6～8的磷酸鹽緩沖溶液中掃穩(wěn)以恢復(fù)電極活性；

進(jìn)一步地，步驟a中谷胱甘肽溶液的濃度為0.4～1.6mM。

進(jìn)一步地，步驟b中移液槍移取的谷胱甘肽溶液的體積為2～8μL。

進(jìn)一步地，步驟b中孵育溫度為0～6oC。

進(jìn)一步地，步驟d中孵育時(shí)間為4～12h。

進(jìn)一步地，步驟c中氨基酸對(duì)映體為色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。

進(jìn)一步地，步驟c中氨基酸對(duì)映體的濃度均為0.1～1.0mM。

進(jìn)一步地，步驟c中靜置時(shí)間為30～90s。

本發(fā)明的有益效果是：谷胱甘肽溶液的制備方法簡(jiǎn)單環(huán)保；且由于谷胱甘肽具有一定的手性環(huán)境，谷胱甘肽修飾電極對(duì)氨基酸對(duì)映體有著較好的識(shí)別能力。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說(shuō)明。

圖1為實(shí)施例二中谷胱甘肽修飾電極的循環(huán)伏安圖。

圖2為實(shí)施例三中谷胱甘肽修飾電極對(duì)色氨酸對(duì)映體的識(shí)別效果圖。

圖3為實(shí)施例三中谷胱甘肽修飾電極對(duì)酪氨酸對(duì)映體的識(shí)別效果圖。

圖4為實(shí)施例三中谷胱甘肽修飾電極對(duì)苯丙氨酸對(duì)映體的識(shí)別效果圖。

具體實(shí)施方式