[發(fā)明專利]多酚類化合物在制備死亡相關蛋白激酶乙酰化抑制劑中的應用

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• 申請日: 2018-04-17
• 公開（公告）號: CN108567770A
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發(fā)明（設計）人: 張海濤;汪亞君;伍俊
• 申請（專利權）人: 廣東醫(yī)科大學
• 主分類號: A61K31/352
• 分類號: A61K31/352;A61K31/05;A61P35/00;C12Q1/48
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 劉瑤云;陳偉斌

本發(fā)明屬于醫(yī)學和分子生物學技術領域，具體公開了多酚類化合物在制備死亡相關蛋白激酶乙酰化抑制劑中的應用。本發(fā)明發(fā)現癌細胞中死亡相關蛋白激酶DAPK在第978位點賴氨酸殘基（K978）發(fā)生乙酰化，該位點乙酰化影響DAPK穩(wěn)定性和活性，參與調節(jié)細胞生長和代謝，乙酰化的DAPK促進癌細胞生長和遷移，而多酚類化合物能抑制DAPK在該位點的乙酰化，因此多酚類化合物可用于制備DAPK乙酰化抑制劑，還可用于制備抑制癌細胞生長和遷移的制劑，還可用于制備抗腫瘤藥物，對臨床治療糖尿病、卒中、神經退行性疾病和腫瘤等疾病有重要意義。

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)學和分子生物學技術領域，具體地，涉及多酚類化合物在制備死亡相關蛋白激酶乙酰化抑制劑中的應用。

背景技術

死亡相關蛋白激酶（Death-associated protein kinase，DAPK）是一種存在于細胞質中的Ca²⁺/鈣調蛋白（CaM）依賴性的絲氨酸/蘇氨酸激酶，蛋白質分子量為160kDa。DAPK含多個功能結構域：典型的Ser/Thr激酶結構域；Ca²⁺/CaM調節(jié)結構域；含8個錨定重復序列（Ankyrin repeats）的結構域；Ras蛋白質復合體-Ras蛋白質復合體C末端結構域（ROC-CORdomain, Ras of complex proteins-C-terminal of ROC domain）；DAPK在C-末端含一個典型的死亡結構域，死亡結構域后的C-末端是由17個氨基酸殘基組成的富含Ser殘基區(qū)域，該區(qū)域是DAPK激酶活性的負調控結構域（如圖1所示）。

DAPK作為一種抑制細胞生長的正向調節(jié)因子，可被多種因素所激活。從目前各方面的研究結果顯示，DAPK參與細胞多種生理和病理過程：凋亡、自噬、糖代謝、免疫反應、腫瘤轉移、tau蛋白病、細胞轉化等。DAPK不僅是多種因素誘導細胞凋亡信號的匯合點，還參與抑制腫瘤細胞轉移。但是，目前現有技術中尚不清楚DAPK是否存在乙酰化位點，以及乙酰化位點與腫瘤細胞生長和轉移的關系。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供多酚類化合物在制備死亡相關蛋白激酶乙酰化抑制劑中的應用。本發(fā)明發(fā)現多酚類化合物能夠抑制腫瘤細胞或癌細胞中DAPK第978位點賴氨酸殘基（K978）發(fā)生乙酰化。

本發(fā)明的另一目的在于提供多酚類化合物在制備抑制腫瘤細胞或癌細胞生長增殖和/或遷移的制劑中的應用。

本發(fā)明的另一目的在于提供多酚類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。

本發(fā)明的另一目的在于提供白藜蘆醇在制備通過抑制死亡相關蛋白激酶乙酰化進而抑制癌細胞生長增殖和/或遷移的制劑中的應用。

本發(fā)明的另一目的在于提供高良姜素在制備通過抑制死亡相關蛋白激酶乙酰化進而抑制癌細胞生長增殖和/或遷移的制劑中的應用。

本發(fā)明的另一目的在于提供死亡相關蛋白激酶的乙酰化位點在制備癌癥診斷試劑盒中的應用。

為了實現上述目的，本發(fā)明是通過以下方案予以實現的：

本發(fā)明用免疫共沉淀技術結合LC-MS/MS技術分析首次發(fā)現癌細胞中DAPK在第978位點賴氨酸殘基（K978）發(fā)生乙酰化，該位點乙酰化影響DAPK穩(wěn)定性和活性，參與調節(jié)細胞生長和代謝，乙酰化的DAPK促進癌細胞生長和遷移。因此，可將該位點作為抑制腫瘤細胞或癌細胞生長和轉移的靶點，通過抑制該位點乙酰化，進而抑制腫瘤細胞或癌細胞的生長增殖和轉移。此外，該位點還可作為細胞抗衰老的靶點，通過抑制該位點乙酰化，進而抑制細胞的衰老和分化。