[發明專利]一種多糖及用作BCAT1基因沉默劑治療肺癌的用途在審
| 申請號: | 201810342086.4 | 申請日: | 2018-04-17 |
| 公開(公告)號: | CN108440679A | 公開(公告)日: | 2018-08-24 |
| 發明(設計)人: | 宋廣 | 申請(專利權)人: | 宋廣 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00;A61K31/715;A61P35/04;A61P35/00;A61P11/00 |
| 代理公司: | 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238 | 代理人: | 趙超 |
| 地址: | 214174 江蘇省無錫市*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 草果 基因沉默劑 肺癌 濃縮干燥 粗多糖 洗脫液 上樣 制備 精制 圖譜 治療 蒸餾水 碳酸氫銨溶液 目標色譜峰 純水浸泡 凝膠填料 梯度洗脫 纖維素柱 苯酚法 脫蛋白 洗脫物 醇沉 管數 溶脹 水提 透析 吸光 裝柱 硫酸 流出 繪制 追蹤 合并 檢測 配置 | ||
1.一種精制多糖B,其特征在于,通過如下步驟制備而成:
步驟S1,草果粗多糖的提取:將草果粉碎,先用超聲提取,再用沸水回流提取,冷卻,離心,取上清液濃縮,Sevag法脫蛋白,加入無水乙醇,靜置過夜,再經離心后取沉淀,用無水乙醇洗滌,冷凍干燥即得草果粗多糖;
步驟S2,氯化鈉分級洗脫物的制備:將DEAE-52纖維素填料裝入層析柱平衡,配置草果粗多糖溶液上樣;依次采用蒸餾水、0.1、0.3mol/LNaCl溶液進行梯度洗脫,分別洗脫15個柱體積;0.3mol/LNaCl溶液收集為一個組分,注入透析袋進行透析,以蒸餾水作為外部滲透液,透析去除氯離子;將0.3mol/LNaCl溶液洗脫物濃縮干燥;
步驟S3,精制多糖B的純化制備:將Sephacryl S400型凝膠填料純水浸泡過夜充分溶脹后裝柱,配置0.3mol/LNaCl溶液洗脫物溶液上樣;以0.1mol/L碳酸氫銨溶液為洗脫液,流速為0.3mL/min,每6mL收集一管;以硫酸-苯酚法追蹤檢測多糖的流出,以管數為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪制多糖的出峰圖譜,根據圖譜合并目標色譜峰對應的流份,濃縮干燥得到精制多糖B。
2.根據權利要求1所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S1于4000r/min離心10min。
3.根據權利要求1所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S1加入四倍體積無水乙醇。
4.根據權利要求1所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S2粗多糖溶液濃度為10mg/mL。
5.根據權利要求1所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S2NaCl溶液流速為2mL/min。
6.根據權利要求1所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S2透析袋為3500Da透析袋。
7.根據權利要求6所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S2透析48h。
8.根據權利要求1所述的精制多糖B,其特征在于:步驟S3中,0.3mol/LNaCl溶液洗脫物溶液的濃度為20mg/mL。
9.權利要求1-8任一所述精制多糖B用作BCAT1蛋白抑制劑的用途。
10.權利要求1-8任一所述精制多糖B用于抑制肺癌侵襲轉移的用途。
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