[發明專利]一種大豆蛋白肽及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 201810342079.4 | 申請日： | 2018-04-17 |
| 公開（公告）號： | CN108531532A | 公開（公告）日： | 2018-09-14 |
| 發明（設計）人： | 沈新春;馮晨;汪芳;隋慧琳 | 申請（專利權）人： | 南京財經大學 |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/14;C07K1/36 |
| 代理公司： | 江蘇圣典律師事務所 32237 | 代理人： | 鄧麗;王偉 |
| 地址： | 210023 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 大豆蛋白肽 制備方法和應用 大豆分離蛋白 大豆肽液 凝膠柱色譜分離 堿性蛋白酶 超濾分離 成骨細胞 增殖作用 超純水 超濾膜 酶解 制備 | ||
1.一種大豆蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述方法步驟為：
（1）原料預處理：將大豆分離蛋白溶于超純水中，配制成3～7%的溶液，調節溶液pH 為7～9；
（2）酶解：在步驟（1）所得溶液中加入堿性蛋白酶酶解，酶解結束后離心取上清液，所得上清液即為粗大豆肽液；
（3）超濾分離：使用超濾膜對步驟（2）所得的大豆肽液進行超濾分離，收集濾出液，冷凍干燥，得到初步分離純化的大豆蛋白活性肽；
（4）葡聚糖凝膠柱層析：選用交聯葡聚糖凝膠柱對步驟（3）所得的活性肽樣品進行進一步分離，洗脫液為超純水，檢測波長為220 nm，對洗脫所得的蛋白質按出峰曲線合并收集，濃縮后真空冷凍干燥。
2.根據權利要求1所述的大豆蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中酶解溫度為50℃，酶解時間為3～8 h，堿性蛋白酶添加量為800～1600 U/g。
3.根據權利要求1所述的大豆蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，90～95℃滅酶10～20 min，室溫冷卻后以3000～4000 r/min 離心10～15min。
4.根據權利要求1所述的大豆蛋白肽的制備方法，其特征在于，所使用超濾膜孔徑為1~10KDa超濾膜。
5.根據權利要求1所述的大豆蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中使用葡聚糖凝膠柱為交聯葡聚糖Sephadex G-15，蛋白濃度為0.5～2%，流速為1.5 ml/min。
6.采用權利要求1-5任一項所述方法制備得到的大豆蛋白肽。
7.權利要求6所述的大豆蛋白肽用于制備促進成骨細胞增殖的食品或藥品。
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