[發明專利]一種枸杞中的酰胺類化合物及酰胺類化合物組分及其制備方法

有效

• 申請號: 201810340746.5
• 申請日: 2018-04-16
• 公開（公告）號: CN108484428B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 楊軍麗;孟憲華;師彥平
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘭州化學物理研究所
• 主分類號: C07C231/24
• 分類號: C07C231/24;C07C235/34;C07C233/22;C07C233/11;C07C233/13;C07D317/60;C07C235/40;A61P25/28
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心代理有限公司 62100
• 代理人: 孫惠娜

1.一種枸杞中的酰胺類化合物的制備方法，其特征在于制備方法包括以下步驟：

1)將枸杞粉碎，用提取溶劑進行提取，所述枸杞和提取溶劑的質量比為1:3-20，得提取液，提取液加壓濃縮至無有機溶劑，得到總浸膏A；

2)將總浸膏A溶于水，再利用D101大孔吸附樹脂柱層析，或者利用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分別萃取，得到不同的浸膏組分；利用D101大孔吸附樹脂柱層析，得到五個不同的浸膏組分；利用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分別萃取，得到四個不同的浸膏組分；

3)對浸膏組分進行硅膠柱層析或MCI柱層析或sephadex LH-20柱層析或反相ODS柱層析，用石油醚-丙酮、二氯甲烷-丙酮、二氯甲烷-甲醇、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇、甲醇-水或乙醇-水為洗脫劑洗脫，等份收集洗脫液，每份洗脫液采用薄板層析色譜定性檢測，合并含相同成分的洗脫液，得到3-20個不同的浸膏組分N-1～N-20；

4)對浸膏N-1～N-20進行制備HPLC分離純化，得到單體化合物，通過多種波譜學技術，確定單體化合物的結構如下：

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：上述化合物具有抗AD活性。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟1)中的提取溶劑為水、甲醇/水的混合溶液或者乙醇/水混合溶液，所述甲醇的體積百分數為0-100％，所述乙醇的體積百分數為0-100％。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟1)中的提取方法有室溫冷浸提取、加熱回流提取、滲漏提取或超聲提取。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟2)中的利用D101大孔吸附樹脂柱層析，所用實驗條件為用乙醇/水混合溶液或甲醇/水混合溶液為洗脫溶劑梯度洗脫，梯度洗脫溶劑體積比為水、30％、60％、80％、100％，不同體積比的洗脫溶劑洗脫體積為2-7倍柱體積，分別將不同體積比的洗脫液濃縮，得到五個浸膏組分。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟2)中利用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分別萃取，所用實驗方法為總浸膏A溶于水后，用等體積的石油醚萃取三次，合并石油醚萃取液，濃縮，得到石油醚相，用同樣的方法分別進行乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到乙酸乙酯相和正丁醇相，萃取完之后所得水相濃縮得到水相。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：所述提取方法室溫冷浸提取每次需要將枸杞在提取溶劑中浸泡3-10天，浸提次數為1-4次；所述提取方法加熱回流提取的加熱溫度為50-100℃，每次提取0.5-3.0小時，提取次數為1-4次；所述提取方法滲漏提取需要將枸杞在提取溶劑中浸泡6-24h，再置于滲漏裝備；所述提取方法超聲提取的提取溫度為30-60℃，頻率為20-50Hz，功率為70-1000W，每次提取0.5-2.0小時，提取次數為1-4次。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟3)中硅膠柱層析或MCI柱層析或sephadex LH-20柱層析或反相ODS柱層析所用洗脫劑石油醚-丙酮中石油醚與丙酮的體積比為30:1～1:3；二氯甲烷-丙酮中二氯甲烷與丙酮的體積比為30:1～1:3；二氯甲烷-甲醇中二氯甲烷與甲醇的體積比為30:1～1:3；氯仿-丙酮中氯仿與丙酮的體積比為30:1～1:3；氯仿-甲醇中氯仿與甲醇的體積比為30:1～1:3；甲醇-水中水與甲醇的體積比為30:1～1:3；乙醇-水中水與乙醇的體積比為30:1～1:3。

9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟4)中多種波譜學技術選自核磁共振譜、質譜、高分辨質譜、紅外、紫外光譜或X-ray單晶衍射譜。

10.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述步驟4)中制備HPLC分離所用色譜柱為半制備Benetnach C18柱，流動相為甲醇-水，甲醇與水的洗脫比例為1:20～1:1，流速為1～5mL/min，進樣體積：1-100μL，檢測器：紫外檢測器，檢測波長：208nm和254nm。