[發(fā)明專利]多重核酸合成的組合物和方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810338977.2 | 申請日: | 2014-03-13 |
| 公開(公告)號: | CN108467863B | 公開(公告)日: | 2022-01-25 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | J·雅各布森;D·辛德勒;I·薩奧爾默;S·勞頓;M·J·戈德伯格;M·E·赫德森;L·A·昆 | 申請(專利權(quán))人: | GEN9股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10;C12P19/34 |
| 代理公司: | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100 | 代理人: | 陶啟長 |
| 地址: | 美國馬*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 多重 核酸 合成 組合 方法 | ||
1.一種生成至少一種有預(yù)定序列的靶核酸的方法,所述方法包括:
將第一多個(gè)雙鏈寡核苷酸和第二多個(gè)雙鏈寡核苷酸連接于所述第二多個(gè)雙鏈寡核苷酸的5’末端,并將第二多個(gè)雙鏈寡核苷酸和第三多個(gè)雙鏈寡核苷酸連接于所述第二多個(gè)雙鏈寡核苷酸的3’末端,其中所述第一多個(gè)雙鏈寡核苷酸具有第一多個(gè)3'突出端,所述第二多個(gè)雙鏈寡核苷酸具有第一多個(gè)5'突出端和第二多個(gè)3'突出端,且所述第三多個(gè)雙鏈寡核苷酸具有第二多個(gè)5'突出端,其中所述第一多個(gè)3'突出端設(shè)計(jì)為與所述第一多個(gè)5'突出端互補(bǔ),并且所述第二多個(gè)3'突出端設(shè)計(jì)為與第二多個(gè)5'突出端互補(bǔ);
從而形成至少一種靶核酸。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其中第一多個(gè)3’突出端各自設(shè)計(jì)為彼此之間相對相互正交;其中第一多個(gè)5’突出端各自設(shè)計(jì)為彼此之間相對相互正交;其中第二多個(gè)3’突出端各自設(shè)計(jì)為彼此之間相對相互正交;并且其中第二多個(gè)5’突出端各自設(shè)計(jì)為彼此之間相對相互正交。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法,還包括任選地重復(fù)所述連接步驟。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法,其還包括:提供具有第三多個(gè)突出端的多個(gè)雙鏈錨定寡核苷酸,其中所述錨定寡核苷酸連接至支持物。
5.如權(quán)利要求4所述的方法,其中所述第一多個(gè)雙鏈體具有第三多個(gè)5’突出端,并且其中所述第三多個(gè)突出端設(shè)計(jì)為與第三多個(gè)5’突出端互補(bǔ)。
6.如權(quán)利要求4所述的方法,其中所述第三多個(gè)突出端各自設(shè)計(jì)為彼此之間相對相互正交。
7.如權(quán)利要求5所述的方法,其中所述第三多個(gè)5’突出端各自設(shè)計(jì)為彼此之間相對相互正交。
8.如權(quán)利要求4所述的方法,其中所述支持物是固體。
9.如權(quán)利要求4-8中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述支持物是珠。
10.如權(quán)利要求4-7中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述支持物是莖環(huán)多核苷酸。
11.如權(quán)利要求4所述的方法,其中多個(gè)錨定寡核苷酸各自固定至相同支持物。
12.如權(quán)利要求4所述的方法,其中多個(gè)錨定寡核苷酸各自固定至不同支持物。
13.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述方法在單一反應(yīng)體積中進(jìn)行。
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