[發明專利]一種利用褪黑素聯合缺氮促進異養微藻油脂積累的方法在審
| 申請號： | 201810337623.6 | 申請日： | 2018-04-16 |
| 公開（公告）號： | CN108588136A | 公開（公告）日： | 2018-09-28 |
| 發明（設計）人： | 余旭亞;趙永騰;李大菲 | 申請（專利權）人： | 昆明理工大學 |
| 主分類號： | C12P7/64 | 分類號： | C12P7/64;C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 黑素 藻細胞 誘導 異養微藻 油脂積累 單針 母液 微藻 稀釋 藻液 生物技術領域 有機溶劑提取 葡萄糖 對數生長期 基礎培養基 光照條件 微藻生長 無水乙醇 異養培養 誘導培養 培養基 產業化 生物量 重懸浮 配制 聯合 生長 保證 | ||
1.一種利用褪黑素聯合缺氮促進異養微藻油脂積累的方法，其特征在于，具體步驟如下：
（1）誘導藻液的制備：在溫度為24~26℃條件下，以10 g/L葡萄糖為碳源的BG-11基礎培養基異養培養單針藻，待單針藻生長至對數生長期后期收集藻細胞，用缺氮的BG-11培養基稀釋重懸浮藻細胞至0.85~1 g/L作為誘導藻液；
（2）誘導藻細胞積累油脂：用無水乙醇配制100 μmol/L的褪黑素母液，將褪黑素母液添加到步驟（1）的誘導藻液中稀釋褪黑素濃度為0.1~10 μmol/L，并置于溫度為24~26℃、光照條件下誘導培養；
（3）利用有機溶劑提取步驟（2）藻細胞內的油脂。
2.根據權利要求1所述利用褪黑素聯合缺氮促進異養微藻油脂積累的方法，其特征在于：單針藻為單針藻菌株
3.根據權利要求1所述利用褪黑素聯合缺氮促進異養微藻油脂積累的方法，其特征在于：步驟（2）中光照強度為29~31 μmol m?2 s?1。
4.根據權利要求1所述利用褪黑素聯合缺氮促進異養微藻油脂積累的方法，其特征在于：步驟（3）中有機溶劑為氯仿-甲醇溶液，氯仿-甲醇溶液中氯仿與甲醇的體積比為1:2；有機溶劑提取藻細胞內的油脂的方法為：將培養液經5000 r/min離心富集5 min，用蒸餾水反復洗滌3次后凍干制成干藻粉，稱重；加入石英砂并研磨混勻，再加入氯仿-甲醇溶液重復抽提至藻體發白，離心收集有機相即得油脂；其中石英砂的質量為干藻粉質量的2倍。
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