[發明專利]基因ARR5在提高植物抗旱能力中的應用

在審

• 申請號: 201810333714.2
• 申請日: 2018-04-13
• 公開（公告）號: CN110387382A
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 施怡婷;王瑜;黃小珍
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/29;C07K14/415;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/46
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;黃爽

1.基因ARR5在提高植物抗旱能力中的應用，其特征在于，所述基因ARR5的核苷酸序列為：

i)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；或

ii)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列經取代、缺失和/或增加一個或多個核苷酸且具有相同功能的核苷酸序列；或

iii)在嚴格條件下與SEQ ID NO:1所示序列雜交且具有相同功能的核苷酸序列，所述嚴格條件為在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下雜交，并用該溶液洗膜；或

iv)與i)、ii)或iii)的核苷酸序列具有90％以上同源性且具有相同功能的核苷酸序列。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述植物包括單子葉植物和雙子葉植物。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述植物包括擬南芥和玉米。

4.根據權利要求1-3任一項所述的應用，其特征在于，所述應用包括：

1)使植物包含ARR5基因；或

2)使植物過表達ARR5基因編碼的蛋白。

5.基因ARR5在植物育種中的應用，其特征在于，所述育種的目的是提高植物抗旱能力，其中，基因ARR5的定義同權利要求1所述。

6.構建抗旱的轉基因擬南芥的方法，其特征在于，提取擬南芥總RNA，反轉錄獲得cDNA，以cDNA為模板，F和R為引物，擴增ARR5基因的CDS序列，將擴增產物構建到植物表達載體上，然后用獲得的重組表達載體轉化農桿菌，接著用轉化的農桿菌侵染擬南芥花序，篩選陽性轉基因植株，獲得抗旱的轉基因擬南芥；

其中，所述引物F和R的核苷酸序列如SEQ ID NO:3-4所示。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述植物表達載體為pCM1307。

8.構建抗旱的轉基因玉米的方法，其特征在于，提取擬南芥總RNA，反轉錄獲得cDNA，以cDNA為模板，F和R為引物，擴增ARR5基因的CDS序列，將擴增產物構建到植物表達載體上，然后用獲得的重組表達載體轉化農桿菌，接著用轉化的農桿菌侵染玉米愈傷組織，篩選陽性轉基因植株，獲得抗旱的轉基因玉米；

其中，所述引物F和R的核苷酸序列如SEQ ID NO:3-4所示。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述植物表達載體為pCUN；載體pCUN改造自質粒pCAMBIA1300，是在pCAMBIA1300中連入潮霉素抗性基因得到的。

10.根據權利要求6-9任一項所述的方法，其特征在于，所述農桿菌為GV3101。