[發(fā)明專利]一種抗真菌藥物靶點及其制備和應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810332992.6 | 申請日： | 2018-04-13 |
| 公開（公告）號： | CN108610401A | 公開（公告）日： | 2018-10-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 曹張軍;姜靜;蔣晨曉 | 申請（專利權(quán)）人： | 東華大學(xué) |
| 主分類號： | C07K14/40 | 分類號： | C07K14/40;C12N15/70;C12Q1/34 |
| 代理公司： | 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 31233 | 代理人： | 黃志達;魏峯 |
| 地址： | 201620 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 靶點 抗真菌藥物 制備和應(yīng)用 高通量篩選技術(shù) 翻譯起始因子 氨基酸序列 白色念珠菌 靶點蛋白 藥物篩選 激活劑 抑制劑 蛋白 篩選 研究 | ||
1.一種抗真菌藥物靶點，其特征在于：所述抗真菌藥物靶點為白色念珠菌翻譯起始因子蛋白Tif1，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一種抗真菌藥物靶點的制備方法，包括：
(1)將白色念珠菌體內(nèi)翻譯起始因子Ca-tif1的原核表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21感受態(tài)細胞中，恒溫培養(yǎng)后挑取單克隆進行活化，然后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD600到0.6～0.8；
(2)將菌液中加入誘導(dǎo)劑，恒溫培養(yǎng)，得到誘導(dǎo)后菌液，然后進行電泳，染色，脫色，最后進行蛋白純化。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗真菌藥物靶點的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中白色念珠菌體內(nèi)翻譯起始因子Ca-tif1的原核表達載體為pET-28a-Ca-tif1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗真菌藥物靶點的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中活化為37℃活化12h。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗真菌藥物靶點的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中誘導(dǎo)劑為異丙基硫代半乳糖苷IPTG。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗真菌藥物靶點的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中蛋白純化為：采用AKTA蛋白質(zhì)純化系統(tǒng)進行純化。
7.一種抗真菌藥物靶點的應(yīng)用，其特征在于：白色念珠菌翻譯起始因子蛋白Tif1作為抗真菌藥物靶點進行抗真菌藥物的篩選。
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