[發(fā)明專利]一種基于同位素稀釋-可編輯多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式的19種苯并咪唑類藥物殘留量的測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810329926.3
• 申請(qǐng)日: 2018-04-11
• 公開（公告）號(hào): CN108519453B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳映璇;陳思敏;林峰;姚仰勛;謝敏玲;鄒游
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 武政

本發(fā)明建立了測(cè)定乳制品中苯并咪唑類藥物及其代謝物殘留量的高效液相色譜?串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜法。試樣采用水?飽和氯化鈉溶液?乙腈溶液提取，乙腈飽和正己烷脫脂凈化直接稀釋后，經(jīng)Atlantis T3(4.6mm×100mm，3μm)色譜柱分離，以乙腈?0.1％甲酸溶液為流動(dòng)相，采用電噴霧離子源串聯(lián)質(zhì)譜，在正離子掃描方式下以可編輯多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(Scheduled MRM)模式檢測(cè)，同位素內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果表明：19種苯并咪唑類藥物在0.02～1.0μg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量限為0.025μg/kg～4.0μg/kg。在三個(gè)加標(biāo)水平下的平均回收率為81.4％～108.2％％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.4％～9.3％。該方法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，抗干擾能力強(qiáng)，回收率和重復(fù)性良好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品中獸藥殘留的檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于同位素稀釋-可編輯多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式的19種苯并咪唑類藥物在乳制品中的殘留量的測(cè)定方法。

背景技術(shù)

一杯奶，強(qiáng)壯一個(gè)民族。近年來頻發(fā)的乳與乳制品的質(zhì)量安全事件引起了人們對(duì)乳制品安全的普遍關(guān)注，特別是獸藥殘留問題。乳制品中的獸藥殘留主要是由于產(chǎn)奶動(dòng)物使用了獸藥后，獸藥或其代謝物進(jìn)入生乳中并由此對(duì)消費(fèi)者帶來健康隱患。苯并咪唑類藥物是一類高效、低毒的驅(qū)蟲藥，被廣泛應(yīng)用于畜牧養(yǎng)殖業(yè)中，常見的主要藥物有奧芬達(dá)唑、芬苯達(dá)唑、阿苯達(dá)唑、甲苯咪唑、氟苯咪唑和噻苯噠唑等。大部分苯并咪唑類驅(qū)蟲藥在動(dòng)物體內(nèi)會(huì)迅速代謝，也有藥物如甲苯達(dá)唑的代謝率較低，主要是以藥物原形排出。苯并咪唑的母核結(jié)構(gòu)“苯并咪唑核”相當(dāng)穩(wěn)定，苯并咪唑類驅(qū)蟲藥在動(dòng)物體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化時(shí)其代謝反應(yīng)均發(fā)生在藥物的側(cè)鏈，主要包括氧化、羰基還原、氨基甲酸酯結(jié)構(gòu)水解等，如噻苯達(dá)唑用藥后迅速代謝為5- 羥基噻苯達(dá)唑。阿苯達(dá)唑在動(dòng)物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物有阿苯達(dá)唑砜、阿苯達(dá)唑亞砜，阿苯達(dá)唑亞砜和阿苯達(dá)唑-2-氨基砜。有文獻(xiàn)報(bào)道苯并咪唑類驅(qū)蟲藥中的丁苯達(dá)唑、噻苯達(dá)唑酯、阿苯達(dá)唑、奧芬達(dá)唑?qū)θ焉镌缙诰d羊的胎兒有致畸作用。也有資料報(bào)道一些苯并咪唑驅(qū)蟲藥的代謝物如亞砜產(chǎn)物、羥化產(chǎn)物仍具有強(qiáng)的抗蟲活性，甚至高于藥物的原形，這些代謝物還有一定的胚胎毒性。此外大量研究或應(yīng)用資料顯示當(dāng)高劑量使用或較長時(shí)間使用苯并咪唑類藥物時(shí), 在多種動(dòng)物體內(nèi)顯示致畸和胚胎毒性,主要為骨胳畸形。鑒于苯并咪唑類驅(qū)蟲藥物有可能引起動(dòng)物包括人類的致畸和胚胎毒性，我國以及歐盟、美國、日本等國都將苯并咪唑類藥物列入限制使用的獸藥藥物中，并制訂出各種苯并咪唑類驅(qū)蟲藥物(包括其某些代謝物)在不同動(dòng)物體內(nèi)的最高殘留限量MRL。中國 香港地區(qū)亦將苯并咪唑類藥物列入受限制使用藥物名單中。因此，為保障乳制品安全，尤其是孕婦和嬰幼兒等敏感群體的健康，促進(jìn)畜牧養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展，保障廣大人民群眾的身體健康，乳制品中苯并咪唑類藥物的檢測(cè)，涵蓋的藥物必須足夠多。

國內(nèi)外已發(fā)表的文獻(xiàn)有關(guān)奶和或奶粉中苯并咪唑類藥物的檢測(cè)，大多只檢測(cè)一種或其中幾種苯并咪唑類藥物原藥而沒檢測(cè)代謝物，或者只檢測(cè)其中部分藥物及其代謝物，涉及的苯并咪唑類藥物面不廣。由于苯并咪唑類藥物的某些代謝物如亞砜化物、羥化產(chǎn)物等具有強(qiáng)的胚胎毒性，苯并咪唑類驅(qū)蟲藥殘留的測(cè)定方法必須能夠同時(shí)測(cè)定苯并咪唑類藥物及其某些指定檢測(cè)的代謝物(例如阿苯達(dá)唑的砜化物、亞砜化物等)。已頒布的國家標(biāo)準(zhǔn)適用于奶和奶粉檢測(cè)的是GB/T 22972-2008《牛奶和奶粉中噻苯達(dá)唑、阿苯達(dá)唑、芬苯達(dá)唑、奧芬達(dá)唑、苯硫氨酯殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，我國農(nóng)業(yè)部第235號(hào)公告明確注明奧芬達(dá)唑砜為奧芬達(dá)唑、芬苯達(dá)唑和苯硫氨酯的標(biāo)志殘留物，故檢測(cè)奧芬達(dá)唑、芬苯達(dá)唑和苯硫氨酯必須同時(shí)檢測(cè)其代謝物奧芬達(dá)唑砜；噻苯達(dá)唑和5-羥基噻苯達(dá)唑?yàn)猷绫竭_(dá)唑的標(biāo)志殘留物，故檢測(cè)噻苯達(dá)唑必須同時(shí)檢測(cè)其代謝物5-羥基噻苯達(dá)唑。該標(biāo)準(zhǔn)涉及檢測(cè)的苯并咪唑類藥物較少，涵蓋面不全。目前，國內(nèi)外尚未有關(guān)于乳制品中19種苯并咪唑類藥物的研究及報(bào)道。因此，建立快速準(zhǔn)確測(cè)定乳制品中19種苯并咪唑類藥物殘留量的檢測(cè)方法，用以保障食品安全，尤其是孕婦和嬰幼兒等敏感群體的健康，已迫在眉睫。