[發(fā)明專利]復合微生物土壤修復劑及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810329646.2
• 申請日: 2018-04-12
• 公開（公告）號: CN108441451B
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發(fā)明（設計）人: 謝悅波;姚竣耀;劉才群
• 申請（專利權）人: 江蘇世邦生物工程科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/06;C12R1/125
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 李瑤

1.一種復合微生物土壤修復劑，其特征在于，該復合微生物土壤修復劑包括節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)菌劑、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌劑和復合酶；所述復合酶由甘油醛-3-磷酸脫氫酶和 β-淀粉酶構成，其中，所述復合微生物土壤修復劑中，節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)菌劑、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌劑和復合酶的質(zhì)量比為1∶0.6～1.5∶0.2～0.5；所述節(jié)桿菌 (Arthrobacter sp.)菌劑保藏編號為CGMCC No.8181，保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心；所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌劑保藏編號為CGMCC No.9377，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述復合酶中，甘油醛- 3-磷酸脫氫酶和 β-淀粉酶的重量比為 1∶2～5；所述復合微生物菌劑中，節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)的活菌含量為 5×10⁸ ～1.0×10 ¹⁰ cfu/g，枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的活菌含量為 1.0×10⁹ ～1.0×10¹⁰ cfu/g；所述復合微生物菌劑中，所述甘油醛-3-磷酸脫氫酶的濃度為 15～18 U/mg，β -淀粉酶的濃度為 25～35 U/mg。

2.一種制備權利要求 1所述的復合微生物土壤修復劑的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1)將節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)菌劑和枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌劑按照1∶0.6～1.5的質(zhì)量比混合均勻；

2)向步驟 1)制得的復合菌劑中加入所述復合酶，混合均勻，即得所述復合微生物土壤修復劑。

3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)菌劑的制備方法包括：將節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)培養(yǎng)到對數(shù)期，然后按培養(yǎng)基體積 2％～5％的接種量將培養(yǎng)到對數(shù)期的菌種接種到LB 培養(yǎng)基中，25～37 ℃下，搖床震蕩 120～180rpm，培養(yǎng) 40～48小時，得到節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)發(fā)酵液，向該發(fā)酵液中加入吸附劑，干燥，即得節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)菌劑；所述吸附劑為硅藻土、草炭、發(fā)酵后的油枯或活性炭的一種或幾種。

4.根據(jù)權利要求 2所述的方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌劑的制備方法包括：將枯草芽孢桿菌培養(yǎng)到對數(shù)期，然后按培養(yǎng)基體積 2％～5％的接種量將培養(yǎng)到對數(shù)期的菌種接種到 LB 液體培養(yǎng)基中，25～37 ℃下，搖床震蕩 120～180rpm，培養(yǎng) 24～48小時，加入吸附劑，干燥，制得枯草芽孢桿菌菌劑；所述吸附劑為硅藻土、草炭、發(fā)酵后的油枯或活性炭的一種或幾種。

5.權利要求 1所述的復合微生物土壤修復劑在土壤修復中的應用。