[發(fā)明專利]一種DNA編碼技術(shù)與納米孔技術(shù)聯(lián)用的癌癥標(biāo)志物檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810329508.4
• 申請(qǐng)日: 2018-04-13
• 公開（公告）號(hào): CN108531592B
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳海臣;劉蕾;李婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所;中國(guó)科學(xué)院高能物理研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6804;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;何葉喧

1.探針組合甲，由探針?、探針Ⅱ、探針Ⅲ、探針Ⅳ和探針Ⅴ組成；

所述探針?是將瓜環(huán)借助連接臂修飾于序列表的序列1所示的單鏈DNA分子自5’端第11位堿基得到的；所述連接臂由磷酸基團(tuán)、三氮唑和二茂鐵組成；

所述探針Ⅱ是將瓜環(huán)借助連接臂修飾于序列表的序列1所示的單鏈DNA分子自5’端第11位堿基得到的；所述連接臂由磷酸基團(tuán)、酰胺鍵和二茂鐵組成；

所述探針Ⅲ是將瓜環(huán)借助連接臂修飾于序列表的序列2所示的單鏈DNA分子自5’ 端第6位堿基得到的；所述連接臂由磷酸基團(tuán)、三氮唑和二茂鐵組成；

所述探針Ⅳ是將瓜環(huán)借助連接臂修飾于序列表的序列1所示的單鏈DNA分子5’ 末端得到的；所述連接臂由磷酸基團(tuán)、三氮唑和二茂鐵組成；

所述探針Ⅴ是將瓜環(huán)借助連接臂修飾于序列表的序列1所示的單鏈DNA分子5’ 末端得到的；所述連接臂由磷酸基團(tuán)、spacer18官能團(tuán)、三氮唑和二茂鐵組成。

2.權(quán)利要求1所述探針組合甲的應(yīng)用，為如下（a1）-（a4）中的任一種：

（a1）檢測(cè)單一抗原；

（a2）同時(shí)檢測(cè)兩種或三種或四種或五種抗原；

（a3）制備檢測(cè)單一抗原的試劑盒；

（a4）制備同時(shí)檢測(cè)兩種或三種或四種或五種抗原的試劑盒；

所述應(yīng)用為非疾病診斷的應(yīng)用。

3.含有權(quán)利要求1所述探針組合甲的試劑盒，所述試劑盒的用途為如下（b1）或（b2）：

（b1）檢測(cè)單一抗原；

（b2）同時(shí)檢測(cè)兩種或三種或四種或五種抗原。

4.用于檢測(cè)一種抗原的組合物甲，包括組件A、組件B和組件C；

所述組件A為權(quán)利要求1所述探針組合甲中的任一探針；

所述組件B為偶聯(lián)有捕獲抗體的磁珠；

所述組件C為偶聯(lián)有檢測(cè)抗體和特異DNA的納米金顆粒；

所述捕獲抗體和檢測(cè)抗體能夠與待測(cè)抗原分子形成捕獲抗體-待測(cè)抗原-檢測(cè)抗體夾心復(fù)合物；所述特異DNA能夠與所述探針結(jié)合。

5.用于同時(shí)檢測(cè)n種抗原的組合物乙，包括n種組合物；

每種組合物包括權(quán)利要求4中所述的組件A、組件B和組件C；

n種組成物檢測(cè)的抗原不同；

n種組成物中的探針不同；

n為2-5之間的任意自然數(shù)。

6.系統(tǒng)甲或系統(tǒng)乙或系統(tǒng)丙；

所述系統(tǒng)甲包括權(quán)利要求1所述的探針組合甲和樣品池系統(tǒng)；

所述系統(tǒng)乙包括權(quán)利要求3所述的試劑盒和樣品池系統(tǒng)；

所述系統(tǒng)丙包括權(quán)利要求5所述的組合物乙和樣品池系統(tǒng)；

所述樣品池系統(tǒng)包括兩個(gè)隔室，兩個(gè)隔室被聚四氟乙烯膜分隔；所述聚四氟乙烯膜中間具有一個(gè)直徑為100-150μM的孔，所述通孔被磷脂雙分子層充滿，在所述磷脂雙分子層中存在一個(gè)由α-溶血素七聚體蛋白形成的納米孔；樣品池系統(tǒng)中應(yīng)用Ag/AgCl電極組成閉合回路。

7.權(quán)利要求6所述系統(tǒng)甲或系統(tǒng)乙或系統(tǒng)丙的應(yīng)用，為如下（c1）或（c2）：

（cb1）檢測(cè)單一抗原；

（c2）同時(shí)檢測(cè)兩種或三種或四種或五種抗原；

所述應(yīng)用為非疾病診斷的應(yīng)用。