[發明專利]一種新型阿魏酸酯酶及其編碼基因和應用有效
| 申請號： | 201810324103.1 | 申請日： | 2018-04-12 |
| 公開（公告）號： | CN108342371B | 公開（公告）日： | 2022-06-24 |
| 發明（設計）人： | 辛志宏;李宣宣;郭佳;胡伊旻;南放;姜俊偉;楊雨蒙;吳盛露 | 申請（專利權）人： | 南京農業大學 |
| 主分類號： | C12N9/18 | 分類號： | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/10;C12N15/70;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京天華專利代理有限責任公司 32218 | 代理人： | 競存;徐冬濤 |
| 地址： | 211225 江蘇省南京市溧*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 新型 阿魏酸 及其 編碼 基因 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種阿魏酸酯酶，其特征在于，所述阿魏酸酯酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.編碼權利要求1所述阿魏酸酯酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQID No.1所示。
3.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體含有權利要求2所述的基因。
4.根據權利要求3所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體為pET-28a。
5.一種重組阿魏酸酯酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：制備權利要求3或4所述的表達載體，用所述表達載體轉化宿主細胞，培養轉化體，從培養物中分離得到所述重組阿魏酸酯酶。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，具體步驟為：將權利要求2所述基因的PCR擴增產物經NcoI和HindIII雙酶切，與pET-28a載體連接；用pET-28a表達載體轉化大腸桿菌BL21(DE3)，培養轉化體，經IPTG誘導，從培養物中分離純化，獲得重組阿魏酸酯酶。
7.用于權利要求2所述編碼阿魏酸酯酶的基因的特異性擴增的引物，其特征在于，引物為以下兩條序列：
上游引物：5’-CATGCCATGGGCATGCGTGCAGGGGGGAG-3’(SEQ ID No.3)；
下游引物：5’-CCCAAGCTTCCGGCCGCTCAGCCAGT-3’(SEQ ID No.4)。
8.權利要求1所述阿魏酸酯酶在食品工業、制藥工業和飼料工業中的應用。
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