[發(fā)明專利]Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810323725.2
• 申請(qǐng)日: 2018-04-12
• 公開（公告）號(hào): CN108659139A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范三紅;張錦華;任嘉興
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 太原晉科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 王瑞玲

1.一種Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法，其特征在于：利用Minitab17 軟件，根據(jù)Plackett-Burman 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提取羊肚菌多糖的料液比、酶用量、酶解pH值、酶解時(shí)間、酶解溫度，超聲功率、超聲溫度，超聲時(shí)間，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以羊肚菌多糖得率作為響應(yīng)值，對(duì)料液比、酶用量、酶解時(shí)間、酶解pH值、超聲時(shí)間5個(gè)影響因素進(jìn)行評(píng)價(jià)，篩選出主效應(yīng)因子，將主效應(yīng)因子作為響應(yīng)面設(shè)計(jì)的因素，建立響應(yīng)值與各因素之間的數(shù)學(xué)模型，依據(jù)模型預(yù)測(cè)羊肚菌多糖的理論得率，然后確定羊肚菌多糖提取的最佳工藝參數(shù)，用超聲波輔助提取羊肚菌多糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

（1）原料處理：挑選羊肚菌子實(shí)體，清洗、干燥粉碎后過80目篩；

（2）單因素實(shí)驗(yàn)：控制酶解溫度為50℃、超聲功率 240 W、超聲溫度 50 ℃，以羊肚菌多糖得率為響應(yīng)值，利用Minitab17軟件，根據(jù)Plackett-Burman 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提取羊肚菌多糖的料液比、酶用量、酶解pH值、酶解時(shí)間和超聲時(shí)間，分別考察料液比為1:10、1:15、1:20、1:25g/mL，酶用量為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0%，酶解pH為3.2、3.6、4.0、4.4、4.8，酶解時(shí)間為20、40、60、80、100 min，超聲時(shí)間為10、20、30、40、50 min條件下對(duì)羊肚菌多糖提取效果的影響；

（3）Plackett-Burman 實(shí)驗(yàn)：在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以羊肚菌多糖得率作為響應(yīng)值，對(duì)5個(gè)影響因素進(jìn)行評(píng)價(jià)，篩選出主效應(yīng)因子；

（4）響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：依據(jù)Plackett-Burman 實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選主效應(yīng)因子作為響應(yīng)面設(shè)計(jì)的因素，建立響應(yīng)值與各因素之間的數(shù)學(xué)模型，依據(jù)模型預(yù)測(cè)羊肚菌多糖的理論得率，確定羊肚菌多糖提取的工藝參數(shù)；

（5）根據(jù)優(yōu)化的工藝參數(shù)條件，采用纖維素酶解與超聲波輔助提取羊肚菌多糖。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法，其特征在于：纖維素酶酶解溫度為50℃，過篩后的羊肚菌子實(shí)體粉末與蒸餾水按照料液比為1:10-1:25g/ml混合，酶用量為羊肚菌子實(shí)體粉末質(zhì)量的0.2-1.0%，酶解pH值為3.2-4.8，酶解時(shí)間為20-100min。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法，其特征在于：超聲波提取的超聲波功率為240W，超聲溫度為50℃，超聲時(shí)間為10-50min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法，其特征在于：超聲處理后進(jìn)行滅酶處理：90℃滅酶30min后4500r/min離心15min，提取上清液，用體積為上清液體積3倍的95%乙醇醇沉過夜，然后4500r/min離心15min，沉淀用蒸餾水復(fù)溶，定容至100mL,稀釋25倍，測(cè)定吸光度，計(jì)算羊肚菌多糖得率。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面法聯(lián)用優(yōu)化提取羊肚菌多糖的方法，其特征在于：料液比為1∶22g/mL，酶用量為0.8%、酶解pH為4.0、超聲時(shí)間19min。