[發明專利]一種負載miRNAs的雙層人工血管電紡材料及制備方法

在審

• 申請號: 201810321619.0
• 申請日: 2018-04-11
• 公開（公告）號: CN108721699A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發明（設計）人: 袁曉燕;崔策;周芳;文美玲;趙蘊慧
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: A61L27/40
• 分類號: A61L27/40;A61L27/18;A61L27/50;A61L27/54;D01F8/14;D01F8/16
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 王麗

本發明涉及一種負載miRNAs的雙層人工血管電紡材料及制備方法。內層是將聚乙二醇?b?聚(L?丙交酯?co?ε?己內酯)與聚乙二醇溶于氯仿和N,N?二甲基甲酰胺的混合溶劑中,以此作為油相。以三甲基化殼聚糖?g?聚乙二醇?REDV包載miRNA?126的水溶液作為水相進行乳液電紡,制備電紡纖維材料。外層是以聚(乙交酯?co?丙交酯)溶于氯仿和N,N?二甲基甲酰胺的混合溶劑作為油相,以三甲基化殼聚糖?g?聚乙二醇?VAPG包載miRNA?145的水溶液作為水相,優化電紡過程,制備纖維直徑為2～3μm的電紡纖維材料。可以同時有效控制兩種miRNAs的釋放速率；用于人工血管材料領域。

技術領域

本發明涉及一種負載miRNAs的雙層人工血管電紡材料及制備方法,屬于組織工程與生物醫用材料領域。

背景技術

靜電紡絲技術可制備納米,微米尺度的材料,可以很好地模擬細胞外基質,從而有利于促進細胞的粘附,增殖與生長。同時,電紡纖維可高效地負載基因、蛋白和藥物等活性物質以加強對細胞生理功能的調控。因此,電紡材料在組織工程與生物醫用材料領域具有極高的實際應用價值。然而,單一的電紡纖維膜在組織工程中的應用仍存在不足,細直徑纖維可提高細胞粘附,但不利于細胞向材料內部的生長,粗直徑纖維則與此相反。因此根據細胞類型,可采用雙層或多層纖維直徑不同的電紡纖維膜以滿足多種細胞對材料的不同需求,從而促進組織快速恢復(Q.P.Pham,U.Sharma,A.G.Mikos.Electrospun poly(ε-caprolactone)microfiber and multilayer nanofiber/microfiber scaffolds:Characterization of scaffolds and measurement of cellularinfiltration.Biomacromolecules,2006,7(10):2796-2805)。對于人工血管材料而言,血管內皮細胞與血管平滑肌細胞對電紡纖維取向、孔隙大小的要求不同,因此,制備雙層材料以滿足兩種細胞對材料的需求可更好地促進血管重塑(Z.Tan,X.Gao,T.Liu,Y.Yang,J.Zhong,C.Tong,Y.Tan.Electrospun vein grafts with high cell infiltration forvascular tissue engineering.Materials Science&Engineering C,2017,81:407-415)。

脂肪族聚酯材料聚乙二醇-b-聚(L-丙交酯-co-ε-己內酯)(PELCL)與聚(乙交酯-co-丙交酯)(PLGA)均具有良好的生物相容性與力學性能,近年來,被廣泛應用于組織工程與生物醫用材料領域。MicroRNAs(miRNAs)是非編碼的長度約18-25個核苷酸的單鏈RNA分子,可以與靶mRNA特異性結合影響蛋白質的合成,進而影響細胞的生理特性。miRNA-126可促進血管內皮細胞的遷移與增殖,而miRNA-145可調控血管平滑肌細胞表型,抑制其過度增殖,因此在血管組織工程中具有重要的應用價值。裸露的miRNAs在體內極易失活,在基因治療領域可通過與陽離子載體復合的方法解決此類問題。中國專利CN 105153430A中公開了一種三甲基化殼聚糖-g-聚乙二醇-REDV共聚物的基因載體的制備方法,可以有效地包覆基因和miRNAs。同時,通過血管內皮細胞對小肽REDV的靶向識別,可實現miRNAs的靶向遞送(袁曉燕,周芳,趙蘊慧,任麗霞.一種三甲基化殼聚糖-接枝-聚乙二醇-REDV共聚物及制備方法,CN 105153430A,2015)。將REDV置換為其他小肽如VAPG,則可實現miRNAs對血管平滑肌細胞的靶向遞送。