[發明專利]一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠及其制備方法

在審

• 申請號: 201810318264.X
• 申請日: 2018-04-11
• 公開（公告）號: CN108498452A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發明（設計）人: 肖冬冬;盧慕峻;隋曉鋒;榮立奪;張明;呂向國;燕浩;成歡;王雅梅
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院
• 主分類號: A61K9/06
• 分類號: A61K9/06;A61K47/36;A61K47/10;A61K35/28;A61P15/10
• 代理公司: 上海驍象知識產權代理有限公司 31315
• 代理人: 趙峰

1.一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠，其特征在于：在所述的可注射水凝膠中包裹有人間充質干細胞，在所述的可注射水凝膠中，所述的人間充質干細胞的濃度為1×10⁶ cells/mL。

2.根據權利要求1所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠，其特征在于：所述的含干細胞可注射水凝膠中的溶劑為磷酸鹽緩沖液，在所述的磷酸鹽緩沖液中，含有磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、氯化鈉和氯化鉀，所述的磷酸二氫鉀的濃度為0.27g/L，所述的磷酸氫二鈉的濃度為1.42g/L，所述的氯化鈉的濃度為8g/L，所述的氯化鉀的濃度為0.2g/L；所述的含干細胞可注射水凝膠中的溶質由對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇和羥乙基殼聚糖組成，在所述的含干細胞可注射水凝膠中，所述的對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇溶液的質量百分比濃度5%-20%，對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇的數均分子量為200-20000，所述的羥乙基殼聚糖的質量百分比濃度為1%-5%。

3.根據權利要求1所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠，其特征在于：所述的含干細胞可注射水凝膠溶質包括但不局限于對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇-羥乙基殼聚糖、氧化海藻酸-明膠、海藻酸、透明質酸、殼聚糖、絲素蛋白中的任意一種。

4.權利要求1所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

1)一個原代提取人間充質干細胞的步驟：取離體的病人腹部切除或抽脂的無菌脂肪，脂肪組織經過充分分離和剪碎后，用質量百分比濃度為0.25%的氯霉素溶液清洗，然后用37℃的磷酸鹽緩沖液反復清洗直至靜置后脂肪下層清洗液呈淡紅色；脂肪組織再用質量百分比濃度為0.1%的I型膠原酶消直至乳糜狀，離心收集基質血管部分沉淀，將基質血管部分沉淀用臨床級人間充質干細胞無血清培養基重新沖懸后通過100-μm尼龍濾網過濾，然后注入培養皿中，培養皿在37 ℃含有體積百分比濃度為5%的潮濕二氧化碳的培養箱中培養；

2)一個人間充質干細胞傳代培養的步驟：將步驟1）的人脂肪來源間充質干細胞培養在臨床級人間充質干細胞無血清培養基中，每兩天更換培養液，當細胞融合達到80-90%的時候，用質量百分比濃度為0.25%的胰蛋白酶消化，按1:3的比例傳代；

3)一個制備含干細胞可注射水凝膠的步驟；

4)一個采用可注射水凝膠包裹人間充質干細胞的步驟：將可注射水凝膠倒入無菌樣品瓶中，保持溫度為37 ℃，加入P4代的脂肪來源間充質干細胞，攪拌均勻，使細胞密度為1×10⁶ cells/mL，即得用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠。

5.根據權利要求4所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠的制備方法，其特征在于：在一個制備可注射水凝膠的步驟中：將對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇溶解在磷酸鹽緩沖溶液中，得到質量濃度為5%-20%對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇溶液；將羥乙基殼聚糖溶解在磷酸鹽緩沖溶液中，得到濃度為1%-5%的羥乙基殼聚糖溶液，將所述的對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇溶液與羥乙基殼聚糖溶液溶液等質量在25℃的條件振蕩混合均勻，靜置10-120s，即可得到可注射水凝膠。

6.根據權利要求4所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠的制備方法，其特征在于：所述的人間充質干細胞來自脂肪來源間充質干細胞、骨髓來源間充質干細胞、臍帶間充質干細胞、胎盤間充質干細胞、或者尿源性間充質干細胞。

7.根據權利要求4所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠的制備方法，其特征在于：所述的水凝膠溶質包括但不局限于對羧基苯甲醛修飾的聚乙二醇-羥乙基殼聚糖、氧化海藻酸-明膠、海藻酸、透明質酸、殼聚糖、絲素蛋白中的任意一種。

8.權利要求1所述的一種用于治療勃起功能障礙的含干細胞可注射水凝膠在制備治療勃起功能障礙的藥物中的應用。