[發明專利]一種基于接觸角變化檢測尿糖異常的試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201810317337.3
• 申請日: 2018-04-10
• 公開（公告）號: CN108489869B
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 楊曉東;尚廣瑞;楊卓娟;王慶成;孫艷紅
• 申請（專利權）人: 吉林工程技術師范學院
• 主分類號: G01N13/02
• 分類號: G01N13/02
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 覃婧嬋

本發明涉及一種基于接觸角變化檢測尿糖異常的試劑盒及其應用，屬于醫學檢測領域。所述試劑盒包括：包被有糖敏感聚合物的硅片，尿液預處理液和復蘇液。所述包被有糖敏感聚合物的硅片中，糖敏感聚合物是指以葡萄糖氧化酶、伴刀豆蛋白A或苯硼酸為敏感基元的聚合物。所述尿液預處理液為含有0.3?1wt％疊氮鈉的無水乙醇溶液，所述復蘇液為含有0.1wt％檸檬酸和0.9％NaCl的水溶液。本發明還進一步地提供了所述試劑盒的制備方法及應用。

技術領域

本發明涉及一種基于接觸角變化檢測尿糖異常的試劑盒及其應用，屬于醫學檢測領域。

背景技術

糖尿病是一種高發疾病，早期或無典型癥狀期往往難以發現，呈慢性發病過程，患者往往于15-20年產生并發癥(如：心腦血管病、視力減退、高粘血癥等)就醫后才始知已曾患糖尿病多年。在臨床治療上為了控糖尿病并發癥，需要定期地檢測人體血液中的葡萄糖濃度。這不僅對I型糖尿病患者來說是必須的，對于II型糖尿病患者也是如此。由于血糖耐量檢測、血糖檢測、指末稍微量檢測，均需要進行一日多次的周期性動態檢測自身胰島素分泌功能的調控水平，就需要患者在每次測量前克服刺傷皮膚的心理障礙。

對于大多數患者來說，并不需要測量血糖，而只要控制尿液中的葡萄糖濃度即可。如果通過新陳代謝的刺激超過了腎臟的閾值，就導致生理需要的外的葡萄糖作為尿糖經過腎臟排出，在尿液中的葡萄糖就體現為可以檢測出的濃度。因此，盡管血糖檢測已經相當普及，但尿糖檢測作為一種操作簡便的無創檢測方法，仍深受糖尿病患者的歡迎。

目前，對于尿糖檢測臨床上普遍采用尿糖檢測試紙或尿液分析儀進行。尿糖檢測試紙多數是在酶化學基礎上產生葡萄糖依從性的顏色反應。其缺點是準確性較差、靈敏度較低，只能用于尿糖的半定量檢測。而尿液分析儀雖然精度上較檢測試紙有所提高，但仍然僅能用于半定量檢測，無法做到精確定量。

另外，不管是用比色反射法還是電化學生物傳感器法，尿液中各種雜質對尿糖檢測造成嚴重干擾。不同比重尿液中存在干擾物的量有較大差別，高比重尿中含有較多的尿酸等還原性干擾物、大量電解質離子和金屬離子等均會影響尿糖檢測的特異性，造成測試結果的不準確。

隨著時代的發展，功能聚合物的合成及應用受到科學界越來越多的關注。刺激響應型聚合物屬于功能聚合物中的一種，多為雙親性結構，在水中可生成形態各異的聚集體，該類聚集體在外界環境刺激下，如pH值、溫度、光、分子、電解質、電壓或其他因素的變化，會產生特異性的響應變化。其中，葡萄糖響應型聚合物是利用糖和受體間的相互作用而產生相應變化的一類聚合物。一般來講，糖和受體間的相互作用主要有共價和非共價兩種形式。例如，一些人工合成高分子能通過氫鍵和共價鍵協同實現糖響應。這種同時利用共價鍵與非共價鍵協同作用實現糖響應的策略，為開發新的多種作用模式驅動的生物分子響應性體系提供了很好的思路。

發明內容

本發明的第一方面是提供一種基于接觸角變化檢測尿糖的試劑盒，包括：包被有糖敏感聚合物的硅片，尿液預處理液和復蘇液。

在一個實施方案中，所述包被有糖敏感聚合物的硅片中，糖敏感聚合物是指以葡萄糖氧化酶、伴刀豆蛋白A或苯硼酸為敏感基元的聚合物；優選為以苯硼酸為敏感基元的聚合物。上述聚合物可以特定對葡萄糖進行識別響應，進而導致聚合物的性質發生改變，并且這種改變是濃度依賴型的，從而可以精確測定液體中糖含量的變化。

在進一步地實施方案中，所述糖敏感聚合物是指異丙基丙烯酰胺-丙烯酰硫脲基氨基苯硼酸共聚物。所述聚合物通過硫脲基團與糖分子之間的氫鍵作用和苯硼酸與糖分子間形成的共價鍵協同作用，實現了對糖分子的高特異性識別，當糖分子與糖敏感聚合物結合后，糖敏感聚合物的疏水性會發生改變，進而通過測定溶液與材料之間的接觸角變化實現溶液中糖含量的測定。

在另一個實施方案中，所述尿液預處理液為含有0.3-1wt％疊氮鈉的無水乙醇溶液；優選為含有0.5wt％疊氮鈉的無水乙醇溶液。