[發明專利]一種具有保濕抑菌功效的細菌纖維素膜的制備方法

在審

• 申請號: 201810315596.2
• 申請日: 2018-04-10
• 公開（公告）號: CN108822323A
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發明（設計）人: 馬霞;王恒;陳世文
• 申請（專利權）人: 上海應用技術大學;上海市第六人民醫院
• 主分類號: C08J7/04
• 分類號: C08J7/04;C08J5/18;C12P19/04;C12R1/01;C08L1/02
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根

1.一種具有保濕抑菌功效的細菌纖維素膜的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

1）將斜面菌種木醋桿菌轉接至斜面培養基中，控制溫度為27-32℃，活化48-72h后得活化好的斜面菌種木醋桿菌；所述的斜面培養基，按重量百分比計算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na₂HPO₄，0.1-0.4%檸檬酸，2-4%的瓊脂和余量的去離子水組成，pH為5-6；上述的斜面培養基在105-121℃的溫度下滅菌15-25min，冷卻至25-30℃后使用；

2）一個培養種子液的步驟，取活化好的斜面菌種木醋桿菌接種至種子培養基中，控制溫度為30-32℃，轉速為140-200r/min，進行培養18-30h，得到種子液；所述的種子培養基，按重量百分比計算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na₂HPO₄，0.1-0.4%的檸檬酸和余量的去離子水組成，pH為5-6，上述的種子培養基在105-121℃的溫度下滅菌15-25min，冷卻至25-30℃后使用；

3）將步驟2）所得的種子液接種至發酵培養基中，所述的種子液與發酵培養基的體積比為6-10：100，振蕩使種子液和發酵培養基混合均勻，靜止培養6-10天后得到細菌纖維素膜；所述的發酵培養基，按重量百分比計算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na₂HPO₄，0.1-0.4%的檸檬酸和余量的去離子水組成，pH為5-6，上述的發酵培養基在105-121℃的溫度下滅菌15-25min，冷卻至25-30℃后使用；

4）將步驟3）所得的細菌纖維素膜用去離子水反復沖洗5-10次，然后浸泡在0.1-1mol/LNaOH的溶液中，75-80℃恒溫水浴1.5-2h，采用0.03-0.05mol/L的醋酸溶液處理細菌纖維素膜至pH為7；

5）將步驟4）處理過所得的細菌纖維素膜裁剪，然后浸泡在質量百分比濃度為0.02-0.4%銀耳多糖溶液中，20-24h后取出，瀝干，生成具有保濕抑菌功效的細菌纖維素膜。

2.如權利要求1所述的一種具有保濕抑菌功效的細菌纖維素膜的制備方法，其特征在于：所述的木醋桿菌為CGMCCNo .1.1812或CGMCCNo .1.2378。

3.如權利要求1所述的一種具有保濕抑菌功效的細菌纖維素膜的制備方法，其特征在于：

步驟1）中控制溫度27℃培養48h；所述的斜面培養基，按重量百分比計算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na₂HPO₄，0.1%的檸檬酸，2%的瓊脂和余量的去離子水組成，pH為5；

步驟2)中取步驟1)中活化好的斜面菌種木醋桿菌接入到100mL種子培養基中，30℃振蕩培養18h，搖床轉速為140r/min；所述的種子培養基，按重量百分比計算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na₂HPO₄，0.1%的檸檬酸和余量去離子水組成，pH為5；

步驟3)中將步驟2）所得的種子液接種至發酵培養基中，種子液與發酵培養基的體積比為6：100，在28℃靜置培養6天；所述的發酵培養基，按重量百分比計算，由 2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na₂HPO₄，0.1%的檸檬酸和余量的去離子水組成，pH為5；

步驟4）中將步驟3）所得的細菌纖維素膜用去離子水反復沖洗5次，浸泡在0.1mol/LNaOH溶液中，80℃水浴2h，采用0.05mol/L醋酸溶液處理細菌纖維素膜至pH為7；

步驟5）中將步驟4）處理過所得的細菌纖維素膜裁剪成正方形，正方形的邊長為3cm，然后浸泡在質量百分比濃度為0.02%銀耳多糖溶液中，24h后取出，瀝干，生成具有保濕抑菌功效的細菌纖維素膜。